Resumen de Caracterización del interactoma de Scramb1, un organizador del ensamblaje del diafragma de filtración en zonas de membrana de tipo balsa lipídica
Los Diafragmas de Filtración (DFs) son complejos multiproteicos que forman un tipo especializado de unión intercelular esencial en el proceso de ultrafiltrado de la sangre que tiene lugar en las nefronas. Los DFs están constituidos por dos proteínas transmembrana: nephrin y NEPH1, cuyos dominios extracelulares interaccionan entre sí. Además, varias proteínas intracelulares adaptadoras establecen enlaces entre los DFs y el citoesqueleto. Mutaciones en las proteínas que forman los DFs, así como su desregulación, llevan a proteinuria y enfermedad renal. En este trabajo, utilizando Drosophila melanogaster como organismo modelo, se ha caracterizado un nuevo componente de los DFs, la escramblasa de fosfolípidos Scramb1. Si bien trabajos previos de nuestro grupo habían establecido que esta proteína era esencial para la formación de los DFs, se desconocía su mecanismo molecular de acción. En este contexto, aquí mostramos mediante microscopía confocal y electrónica que la escramblasa de fosfolípidos Scramb1 se localiza específicamente en los DFs y, por tanto, es un nuevo componente de este complejo multiproteico. Los resultados presentados revelan que esta localización depende, al menos en parte, de la interacción entre la región N-terminal rica en prolina de Scramb1 y la proteína adaptadora Polychaetoid, un componente de los DFs. En estos, Scramb1 es clave para el reclutamiento de la proteína transmembrana Dumbfounded (ortóloga de NEPH1) durante el proceso de ensamblaje de nuevos DFs. La capacidad de Scramb1 de formar oligómeros, determinada en este trabajo, podría facilitar estas funciones de andamiaje. Mediante el análisis del interactoma de Scramb1 hemos revelado que esta proteína interactúa física y genéticamente con Flotilina2, enriquecida en microdominios de membrana de tipo balsa lipídica, sugiriendo que Scramb1 se encuentra en este tipo de microdominios. Ello podría verse favorecido por su palmitoilación, mediada al menos en parte por otro interaccionante de Scramb1, la palmitoiltransferasa Hip14. Por otro lado, hemos identificado una interacción entre Scramb1 y Past1, una proteína perteneciente a la familia EHD de ATPasas asociadas a membranas y con capacidad de remodelarlas. Esto, junto con la interacción genética observada entre Scramb1 y Amphiphysin, una proteína con dominio BAR con la capacidad de inducir la curvatura de la membrana, y la capacidad de Scramb1 de promover el flujo de fosfolípidos entre las dos capas de la membrana celular, sugiere que Scramb1 participa activamente en los procesos de remodelado de membranas que ocurren durante la formación de los DFs
