Papel de los fibroblastos peritumorales en la progresión del cáncer de colon humano: desarrollo de un modelo animal

• Autores: María Ester Fernando Macías
• Directores de la Tesis: L. Barneo Serra (dir. tes.), Jose Fernando Vazquez Villa (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Oviedo ( España ) en 2022
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Juan Ramón de los Toyos González (presid.), Rocío Anula Fernández (secret.), Antonio Rodríguez Infante (voc.), José Ramón Riera Velasco (voc.), Arantzazu Martínez Menéndez (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Ciencias de la Salud por la Universidad de Oviedo
• Materias:
  • Ciencias médicas
    • Farmacodinámica
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: RUO
• Resumen

  • INTRODUCCIÓN El cáncer de colon es la tercera neoplasia en cuanto a incidencia a nivel mundial. Se ha visto que el estroma peritumoral juega un papel importante en este tipo de cáncer. En este estudio centramos nuestra atención en los fibroblastos peritumorales (CAFs), y el ColXI 1, que es un marcador específico de estas células. El objetivo de esta tesis es analizar la influencia de los CAFs en el cáncer de colon y el desarrollo de un modelo de xenotrasplante de cáncer de colon humano en ratones inmunodeprimidos, asociado o no a fibroblastos. MATERIAL Y MÉTODOS Se obtuvieron fibroblastos normales (NF) y peritumorales de muestras quirúrgicas de cáncer de colon. Estas células se cultivaron in vitro, se analizó su capacidad de crecimiento local y se tiñeron con -SMA, vimentina y proColXI 1. Utilizando ratones inmunodeprimidos SCID se realizaron xenotrasplantes heterotópicos en la cabeza del páncreas de células de cáncer de colon humano HT-29 asociados o no a fibroblastos normales o peritumorales. Por otro lado estudiamos muestras de 189 pacientes afectos de cáncer de colon. La matriz extracelular se tiñó con tricrómico verde de Gomori y los CAFs con el anticuerpo monoclonal de ratón anti-proColXI 1. Se obtuvieron datos del área teñida con proColXI 1, del área Gomori y del número de células proColXI 1 positivas. Las imágenes se analizaron con el programa Image J-FIJI que calcula el número de células y el área total de las zonas marcadas, y cuantifica también el número y el área de células no marcadas. Se realizó análisis estadístico por MedCalc v1o y SpSS v15. RESULTADOS Los CAF y NF cultivados fueron proColXI 1 + / VIM +, proColXI 1+ / alphaSMA + y proColXI 1 + / CK19 + en diferentes proporciones sin diferencias entre ellos, pero la curva de crecimiento de CAFs fue significativamente mayor que la del NF (p <0.05). Se desarrollaron tumores de mayor tamaño en los animales que recibieron HT-29 asociado a CAFs. En el estudio de muestras anatomopatológicas de cáncer de colon teñidas con Gomori y anti-proColXI 1, el número total de células del estroma, CAFs y su área fue mayor en estadios tumorales iniciales. El área de Gomori, en cambio, resultó ser menor en estadios iniciales y en casos sin recidiva. CONCLUSIONES Es posible aislar y cultivar fibroblastos normales y peritumorales a partir de muestras de cáncer de colon humano. En el modelo de xenotrasplante, la asociación de fibroblastos peritumorales humanos genera, de forma precoz, tumores más grandes con metástasis hepáticas y pulmonares, que si se trasplantan sólo células de cáncer de colon. En el cáncer de colon, la presencia de mayor volumen de estroma en el tumor se relaciona con estadios avanzados.