Analizar retrospectivamente el contenido leucocitario del lavado broncoalveolar (LBA) mediante citometría de flujo de pacientes remitidos a la Unidad de Citometría del Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca entre los años 2000 y 2018, correlacionar la información clínica, radiológica y anatomopatológica, para evaluar la utilidad de la citometría del LBA en el diagnóstico de las patologías pulmonares más prevalentes, su valor en el pronóstico y monitorización de tratamiento. Correlacionar los parámetros inmunológicos y clínicos para evaluar la utilidad de la citometría de flujo del LBA en el diagnóstico de las patologías pulmonares EPID y no EPID. Evaluar el impacto de las patologías pulmonares en la supervivencia global de los pacientes, para establecer marcadores celulares del LBA determinados mediante citometría de flujo, que tengan utilidad pronóstica en el manejo clínico y terapéutico de los pacientes. METODOLOGIA Se recolectó información retrospectiva a partir de muestras de LBA analizadas en la Unidad de Citometría e Inmunología Tumoral del Servicio de Inmunología del Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca (HCUVA) entre los años 2000 y 2018, fueron incluidos datos demográficos y clínicos durante un periodo de tiempo comprendido entre marzo de 2019 hasta marzo de 2023. Se revisaron 2349 muestras de LBA procedentes de ocho de los nueve hospitales de la Región de Murcia. La información y variables recolectadas estuvieron acorde con las guías consenso ATS/ERS. 2349 muestras de LBA fueron analizadas, solamente se obtuvo información clínica y paraclínica de 1511 muestras con las que se ha realizado esta tesis. CONCLUSIONES 1. La patología EPID impacta negativamente en la esperanza de vida de los pacientes, con una reducción de la supervivencia de entre 10 a 15 años con relación a la población general. 2. La fibrosis pulmonar demostró mayor impacto negativo en la supervivencia global de los pacientes, con una tasa de supervivencia media a 20 años del 43.8% frente al 78.4% del resto de pacientes o al 87% de la población general. 3. La citometría de flujo ofrece resultados rápidos, precisos y objetivos de las cifras de células inmunitarias del LBA (macrófagos alveolares, neutrófilos, eosinófilos células dendríticas CD1a+, linfocitos totales, linfocitos T CD3, CD4 y CD8 y linfocitos B) de utilidad en la catalogación diagnóstica y pronóstica de pacientes con patologías pulmonares y siempre deberán ser interpretados en el contexto clínico del paciente y del resto de pruebas diagnósticas. 4. El análisis computacional de cluster, ha sido concordante con los resultados de citometría. 5. Cifras elevadas de linfocitos (>7%) se asocian a supervivencias globales más largas, mientras que cifras elevadas de neutrófilos (>5%) lo hacen a supervivencias más cortas. La combinación (combinación-LN), permite estratificar el riesgo de los pacientes con patología EPID. 6. La combinación-LN (linfocito-neutrófilo) demostró valor pronóstico en patología EPID y patologías agudas (infecciones y NIA). 7. La tasa de difusión de monóxido de carbono (DLCO) <55.5% complementa la capacidad pronóstica de la combinación-LN, y mejora la clasificación del riesgo. 8. Tanto los linfocitos como las células dendríticas CD1a+ (>0.6%) parecían tener efectos protectores al contrarrestar el efecto negativo de las cifras elevadas de neutrófilos. 9. El efecto protector de los linfocitos es dosis dependiente, cuanto mayor es la infiltración de neutrófilos, mayor debe ser la infiltración de linfocitos para poder contrarrestar el efecto adverso de los neutrófilos. 10. La combinación-NL podría ser de utilidad para personalizar la terapia inmunosupresora. 11. Las cifras de linfocitos en el LBA, en especial la de linfocitos T CD8+, tienen valor pronóstico en pacientes con cáncer. Sin embargo, su papel es contrapuesto, en los pacientes con carcinoma de pulmón, en donde cifras elevadas de linfocitos T CD8 se asocian a peor supervivencia
OBJECTIVES To retrospectively analyze the leukocyte content of bronchoalveolar lavage (BAL) by flow cytometry of patients referred to the Cytometry Unit of the Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca between 2000 and 2018, to correlate clinical, radiological and anatomopathological information, in order to evaluate the usefulness of BAL cytometry in the diagnosis of the most prevalent pulmonary pathologies, its value in prognosis and treatment monitoring. To correlate immunologic and clinical parameters and therefore evaluate the usefulness of ABL flow cytometry in the diagnosis of IDPD and non-IDP pulmonary pathologies. To evaluate the impact of lung pathologies on the overall survival of patients, in order to establish ABL cell markers determined by flow cytometry, which have prognostic utility in the clinical and therapeutic management of patients. METHODOLOGY Retrospective information was collected from ABL samples analyzed at the Cytometry and Tumor Immunology Unit of the Immunology Service of the Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca (HCUVA) between 2000 and 2018, demographic and clinical data were included during from March 2019 to March 2023. A total of 2349 ABL samples from eight of the nine hospitals in the Region of Murcia were reviewed. The information and variables collected were in accordance with the ATS/ERS consensus guidelines. 2349 ABL samples were analyzed, only clinical and paraclinical information was obtained from 1511 samples with which this thesis has been carried out. CONCLUSIONS 1. EPID pathology negatively impacts the life expectancy of patients, with a reduction in survival between 10 to 15 years relative to the general population. 2. Pulmonary fibrosis demonstrated greater negative impact on overall survival of patients, with a mean 20-year survival rate of 43.8% vs. 78.4% in other patients or 87% in the general population. 3. Flow cytometry offers fast, accurate and objective results of the numbers of immune cells in the ABL (alveolar macrophages, neutrophils, eosinophils, CD1a+ dendritic cells, total lymphocytes, CD3, CD4 and CD8 T lymphocytes and B lymphocytes) useful in the diagnostic and prognostic cataloguing of patients with pulmonary pathologies and should always be interpreted in the clinical context of the patient and the rest of the diagnostic tests. 4. The computational cluster analysis has been concordant with the cytometry results. 5. High lymphocyte counts (>7%) are associated with longer overall survival, while high neutrophil counts (>5%) are associated with shorter survival. The combination (combination-LN) allows risk stratification of patients with IDPD pathology. 6. The LN-combination (lymphocyte-neutrophil) showed prognostic value in IDPD pathology and acute pathologies (infections and AIN). 7. Carbon monoxide diffusion rate (DLCO) <55.5% complements the prognostic ability of the combination-LN, and improves risk classification. 8. Both lymphocytes and CD1a+ dendritic cells (>0.6%) appeared to have protective effects by counteracting the negative effect of elevated neutrophil numbers. 9. The protective effect of lymphocytes is dose dependent, the higher the neutrophil infiltration, the higher the lymphocyte infiltration must be to counteract the adverse effect of neutrophils. 10. The NL-combination could be useful to personalize immunosuppressive therapy. 11. Lymphocyte count in BAL, especially CD8+ T lymphocytes, have prognostic value in cancer patients. However, their role is opposite in patients with lung carcinoma, where high numbers of CD8 T lymphocytes are associated with worse survival.
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