Resumen de El papel de las tetraspaninas en la relación del aparato endosomal con el metabolismo celular y la identificación de nuevos mecanismos moleculares implicados en la captación de vesículas
- español
Las tetraspaninas son proteínas transmembrana que por sus características estructurales se relacionan con regiones de membrana con una alta curvatura, como los compartimentos endosomales, estructuras migratorias o las vesículas extracelulares. Es por ello, que tienen un importante papel en la regulación de la red endosomal. Dicha red está a su vez estrechamente ligada al estado metabólico celular, lo cual plantea la posibilidad de que las tetraspaninas jueguen un papel fundamental en la regulación del metabolismo celular. En la presente tesis se explora el papel de distintas tetraspaninas (CD9, CD63 y CD81) como reguladores del sistema endosomal, de la biogénesis de vesículas extracelulares y del estado metabólico celular a través de la fisiología mitocondrial. Las vesículas extracelulares son nanopartículas de origen celular muy importantes en la comunicación intercelular. Debido a la juventud de este campo de investigación hay todavía pocas técnicas para su estudio y los mecanismos moleculares que están detrás de su fisiología todavía no están descritos en su mayor parte. En esta tesis doctoral nos interesamos por el proceso de captación de dichas vesículas extracelulares por parte de las células diana. Hemos desarrollado una técnica para su cuantificación y caracterización utilizando reporteros moleculares fusionados a las tetraspaninas y realizado un cribado de amplio espectro basado en la tecnología CRISPR para identificar nuevos mecanismos moleculares implicados en este proceso. Estos estudios revelaron la implicación del complejo COMMANDER en la captación de vesículas extracelulares
- English
Tetraspanins are transmembrane proteins that due to their structural characteristics are related to membrane regions with a high curvature, such as endosomal compartments, migratory structures or extracellular vesicles. For this reason, they play an important role in the regulation of the endosomal network. This network is, in turn, closely linked to the cellular metabolic state, which raises the possibility that tetraspanins play a fundamental role in the regulation of cellular metabolism. The present thesis explores the role of different tetraspanins (CD9, CD63 and CD81) as regulators of the endosomal system, extracellular vesicle biogenesis and cellular metabolic state through mitochondrial physiology. Extracellular vesicles are cell-derived nanoparticles that are very important in intercellular communication. Due to the youth of this research field, there are still few techniques for their study and the molecular mechanisms behind their physiology are still largely undescribed. In this doctoral thesis we are interested in the uptake process of these extracellular vesicles by target cells. We have developed a technique for their quantification and characterization using molecular reporters fused to tetraspanins and performed a broad-spectrum screening based on CRISPR technology to identify new molecular mechanisms involved in this process. These studies revealed the involvement of the COMMANDER complex in extracellular vesicle uptake
