Caracterización del enzima Terminasa del bacteriófago SPP1 de "Bacillus subtilis"

• Autores: Aránzazu Gual Ruiz de Conejo
• Directores de la Tesis: Juan Carlos Alonso Navarro (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 1998
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Evaristo Suarez Juan (presid.), José Berenguer Carlos (secret.), Rubens López García (voc.), José López Carrascosa (voc.), Antonio Juárez Giménez (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
• Texto completo no disponible (Saber más ...)
• Resumen

  • En el trabajo presentado se lleva a cabo la caracterización de las dos subunidades que componen el enzima terminasa del bacteriófago SPP1 de Bacillus subtilis, su interacción con otras proteínas morfogenéticas y su efecto sobre ADN sustrato, a la vez que se ponen de manifiesto otras actividades asociadas a estas proteínas. Se demuestra que la subunidad menor de la terminasa, G1P, se une específicamente a secuencias comprendidas dentro del sitio pac y se caracteriza la unión a pacL, la parte del mismo que no se encapsida una vez que se ha producido el corte en el concatémero de genomas fágicos. Se ha identificado el dominio de oligomerización (la proteína G1P se comporta como decámero en solución) y lugares de unión a ADN, a G2P y a G6P (la proteína portal). La subunidad mayor, G2P, presenta actividad endonucleolítica, la cual, una vez que la proteína se une a G1P y a posibles factores que inducen cuvatura en el ADN, se hace específica de secuencia. G2P, además, posee actividad ATPasa que se ve potenciada en presencia de G1P y de G6P. Así pues, parece deducirse del trabajo que la terminasa actúa reconociendo la secuencia pac, corta el concatémero de ADN y lo introduce en la cápsida vacía con gasto de energía suministrada por la hidrólisis de ATP. En el proceso interviene G6P y algún factor que induce curvatura en el ADN. Cuando la procápsida está llena, se corta de nuevo el ADN, aunque en esta ocasión el corte es inespecífico de secuencia. Posteriormente se comenzaría un segundo ciclo de encapsidación a partir de este último extremo cortado.