Papel de p21/CDKN1A en la enfermedad hepática crónica: Role of p21/CDKN1A in chronic liver disease (CLD)

• Autores: Arantza Lamas Paz
• Directores de la Tesis: Yulia Nevzorova (dir. tes.), Francisco Javier Cubero Palero (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2022
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Salvador Iborra Martín (presid.), Ana Victoria Marín Marín (secret.), Gonzalo Jorquero Olave (voc.), Rocío Gallego Durán (voc.), Jordi García (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Investigación Biomédica por la Universidad Complutense de Madrid
• Materias:
  • Ciencias médicas
    • Patología
      • Patología experimental
      • Inmunopatología
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Docta Complutense
• Resumen
  • español

    La creciente incidencia de la obesidad y la enfermedad del hígado graso no alcohólico (EHGNA/NASH) representa una seria amenaza para la salud mundial. El gen p21/CDKN1A es un regulador del ciclo celular que está involucrado en procesos celulares esenciales tales como: la detención del ciclo celular, la apoptosis, la diferenciación, la senescencia y la reparación del ADN. El objetivo principal de este estudio fue determinar el papel específico de p21/CDKN1A en la enfermedad hepática crónica. Para ello, se recopilaron datos del transcriptoma de tumores primarios y de tejido sano procedente de pacientes con CHC de la base de datos TCGA. Además, se recogieron biopsias de pacientes procedentes de mujeres y hombres mayores de 20 años que habían sido sometidos a una cirugía bariátrica debido a obesidad (altos niveles de índice EHGNA) de la cohorte española del Hospital Universitario Arrixaca (Murcia, España). Adicionalmente, ratones machos de entre 8 y 14 semanas de edad, B6;129S/J p21+/+ y p21-/- fueron alimentados con dieta occidental (WD), dieta Lieber-DeCarli (LdC) con múltiples episodios de consumo agudo de alcohol o una dieta DUAL que combina la WD con el consumo crónico de alcohol; durante 14, 8 y 18 semanas, respectivamente. Además, se aislaron hepatocitos primarios de ratones silvestres y mutantes, y se realizaron ensayos funcionales de radioactividad con carbono 14 (14C) con sip21. Finalmente, se generaron ratones Alb-Myctg/p21-/- y se evaluó la progresión de la enfermedad hepática a las 52 semanas de edad. Los resultados muestran que la expresión de P21 se encuentra alterada en tumores de pacientes con CHC. Además, la expresión de P21 se ve modificada en la clínica y en modelos múridos de EHGNA/NASH. Los ratones mutantes p21-/- mostraron una disminución significativa en: (a) marcadores séricos de daño hepático (ALT y AST), (b) muerte celular (TUNEL, CC3/8, pRIPK1/3, pMLKL), (c) esteatosis hepática (triglicéridos, Oil Red O y en la oxidación de lípidos - Ppar¿, Fxr1- y reducción en la captación de ácidos grasos y lipogénesis de novo - Ppar¿, Cd36 y Fas), (d) inflamación (CD45, CD11b, IL-6 y Tnf-¿) y (e) marcadores de fibrosis (rojo de Sirio, vimentina, ¿-SMA y Colágeno1¿1) comparados con ratones silvestres p21+/+ en un modelo múrido de EHGNA (dieta DUAL y WD). Sin embargo, no se observaron diferencias significativas entre ratones p21+/+ y p21-/- tras la dieta LdC con múltiples episodios de consumo agudo de alcohol. Además, ensayos de lipogénesis y oxidación de ácidos grasos con 14C en hepatocitos primarios transfectados con sip21 indicaron que p21 tiene un efecto muy significativo en la síntesis de lípidos en hepatocitos. Así mismo, la deleción de p21 en ratones transgénicos AlbMyctg, incrementó la progresión de carcinoma hepatocelular. Por lo tanto, podemos decir que la expresión de P21 se encuentra alterada en la clínica y la preclínica en casos de CHC y EHGNA/NASH. Los ratones p21-/- mostraron protección en modelos experimentales de EHGNA solos o en combinación con alcohol. Nuestros resultados indican que p21/CDKN1A juega un papel fundamental en el metabolismo lipídico del hepatocito, siendo una potencial diana terapéutica en el tratamiento de la enfermedad metabólica del hígado

  • English

    The increasing incidence of obesity and non-alcoholic fatty liver disease(NAFLD/NASH) currently represents a serious threat to global health, potentially leadingto an increase in the number of cases of advanced liver disease, cirrhosis and, ultimately,leading to hepatocellular carcinoma (HCC). The p21/CDKN1A gene is a cell cycleregulator that is involved in essential cellular processes such as: cell cycle arrest,apoptosis, differentiation, senescence, and DNA repair. The main aim of this study wasto evaluate the specific role of p21/CDKN1A in chronic liver disease (CLD)...