Inmunoterapia "STAb" para el tratamiento de neoplasias hematológicas

• Autores: Ángel Ramírez Fernández
• Directores de la Tesis: Belén Blanco Durango (dir. tes.), Luis Álvarez Vallina (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2022
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: José Ramón Regueiro González-Barros (presid.), Joaquín Martínez López (secret.), Natalia Gómez Lozano (voc.), Francisco Martín Molina (voc.), Silvia Martin-Lluesma (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Investigación Biomédica por la Universidad Complutense de Madrid
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Inmunología
      • Anticuerpos
      • Reacción antígeno-anticuerpo
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Docta Complutense
• Resumen
  • español

    La inmunoterapia del cáncer ha progresado considerablemente gracias al desarrollo de tratamientos potencialmente curativos para la leucemia linfoblástica aguda de células B (LLA-B). Las estrategias más efectivas se basan en el uso de anticuerpos biespecíficos (AcBis) anti-CD19 x anti-CD3 y terapias celulares adoptivas con linfocitos T modificados que expresan en su membrana un receptor de antígeno quimérico (CAR, del inglés, Chimeric Antigen Receptor) capaz de reconocer la molécula CD19 (CAR-T19). La administración de células CAR-T19 y la infusión sistémica de AcBis anti-CD19 x anti-CD3 en formato BiTE (del inglés, Bispecific T cell Engager), han demostrado una tasa de respuesta considerable en pacientes con LLA-B refractaria o en recaída (LLA-B R/R). Sin embargo, a pesar de los resultados obtenidos, un 30-60% de los pacientes recaen o progresan al año del tratamiento. En nuestro laboratorio se ha desarrollado la inmunoterapia STAb (del inglés, Secretion of T cell redirecting Antibodies)-T que consiste en la modificación de células T para que secreten AcBis activadores (TCEs, del inglés: T Cell Engagers). En este trabajo hemos realizado un estudio comparativo para determinar la eficacia de las terapias CAR-T y STAb-T anti-CD19 en modelos de LLA-B. Además, hemos estudiado la topología de la sinapsis inmunológica (SI) inducida por ambas estrategias, con especial énfasis en la expresión y dinámica de las moléculas involucradas en la señalización y activación celular. Para el desarrollo de este estudio se generaron vectores lentivirales que codifican un CAR anti-CD19 (CAR-19) de segunda generación (4-1BB-CD3¿) y un TCE anti-CD19 x anti-CD3 en formato BiTE (BiTE-19). Ambas construcciones están basadas en el anticuerpo (Ac) anti-CD19 A3B1, clínicamente validado. A partir de células T primarias y de una línea celular T se generaron, mediante transducción lentiviral, células STAb-T19 que secretaban BiTE-19 funcionalmente activo y activaban específicamente linfocitos T frente a células CD19+ . El BiTE-19 promovió la generación de SIs fisiológicas, con la formación de complejos de activación supramolecular central (cSMAC) y un aclaramiento de F-actina similar al observado en linfocitos T activados a través del receptor específico (TCR, del inglés, T Cell Receptor). Por el contrario, las células CAR-T19 formaron SIs con cúmulos de CD3¿ dispersos y un aclaramiento de F-actina difuso. Los ensayos de función linfocitaria demostraron la capacidad de las células STAbT19 para inducir el reclutamiento policlonal de los linfocitos T no modificados, originando respuesta citotóxicas más rápidas y potentes que las inducidas por células CAR-T19. Además, las células STAb-T19 evitaron el escape leucémico in vitro, incluso a ratios de células T efectoras:células diana muy bajas. Por el contrario, las células CAR-T no controlaron el escape tumoral a ratios bajas, probablemente debido a la disminución de la expresión de CD19 en las células diana y de CAR-19 en las células efectoras. En modelos in vivo, utilizando xenoinjertos LLA-B derivados de líneas celulares y de muestras de pacientes (PDX), tanto las células STAb-T como las células CAR-T19 controlaron la leucemia a corto plazo. Sin embargo, en modelos PDX con tiempos observacionales más largos, en el grupo CAR-T19 se detectó recidiva leucémica a partir de la semana 4, mientras que el grupo tratado con las células STAb-T19 se mantuvo en remisión completa durante 13 semanas. Estos resultados demuestran el potencial de la terapia STAb-T19 como alternativa a las estrategias de redirección de células T actualmente utilizadas en clínica y avalan la realización de ensayos clínicos para evaluar su eficacia y seguridad.

  • English

    Cancer immunotherapy has progressed significantly with the emergence of potentially curative strategies for B-cell acute lymphoblastic leukemia (B-ALL). The most effective approaches are based on the use of anti-CD19 x anti-CD3 bispecific antibodies,and adoptive cell therapies with engineered T lymphocytes expressing a chimeric antigen receptor (CAR) that recognizes the CD19 molecule (CAR-T19). The administration of CAR-T19 cells and the systemic infusion of anti-CD19 x anti-CD3 bispecific T cell engagers (BiTEs) have demonstrated a remarkable response rate in patients with refractory or relapsed B-ALL (R/R B-ALL). However, despite the excellent results reported, 30-60% of treated patients relapse or progress within one year of treatment. In our laboratory, we have developed the immunotherapy STAb (Secretion of T cell redirecting bispecific Antibodies)-T, which consists of the modification of T cells to secrete T cell engagers (TCEs)...