Esta tesis doctoral titulada ¿DOLPHIN MORBILLIVIRUS IN STRANDED MARINE MAMMALS: DIAGNOSIS AND NEUROPATHOLOGICAL CHARACTERIZATION¿, compuesta por el compendio de cuatro publicaciones indexadas en el Journal of Citation Reports, explora aspectos del diagnóstico molecular e inmunohistoquímico (IHC) de Cetacean Morbillivirus (CeMV), la coinfección por protozoos en cetáceos infectados y proporciona una caracterización neuropatológica de las áreas afectadas por la desmielinización, comparando además dos cepas diferentes de DMV circulando en aguas italianas. En detalle: - Un nuevo método RT-PCR RFLP ha sido desarrollado, utilizando primers degenerados dirigidos a un fragmento de 287 pb de una porción conservada del gen N, que ha demostrado ser una herramienta de diagnóstico valiosa, fiable, simple y relativamente económica para el diagnóstico y la identificación de varios genotipos de morbillivirus, así como para la discriminación de diferentes variantes de CeMV sin necesidad de secuenciación.
- La investigación IHC realizada ha mostrado que el anticuerpo policlonal contra Rinderpest Virus resulta más eficiente en la detección de CeMV a través de IHC, en comparación con el anticuerpo monoclonal producido contra Canine Distemper Virus, aunque la calidad de la tinción es, en general, mejor con el anticuerpo monoclonal.
- En la cuenca mediterránea los cetáceos afectados por CeMV pueden desarrollar infecciones protozoarias oportunistas, causadas por agentes pertenecientes a la familia Sarcocystiidae distintos de Toxoplasma gondii.
- Según los datos moleculares e inmunohistoquímicos, la cepa del NE-Atlántico que circula en las aguas italianas parece poseer un mayor potencial neurotrópico y causar una enfermedad aguda/subaguda más grave que la observada previamente durante los eventos de mortalidad inusuales de 2011 y 2013, atribuibles a la cepa del Mediterráneo.
- Un biomarcador específico para la mielina ha demostrado ser eficaz para detectar mielinopatía, lo que confirma la desmielinización en cetáceos con infecciones por CeMV.
- En el interior y alrededor de las áreas desmielinizadas, hay células portadoras de antígenos de morbillivirus de origen principalmente neuronal y microglial, asociadas con una marcada reactividad de astro y microglía. Muy poca tinción de Morbillivirus es evidente en los astrocitos.
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