La infusión intracerebral de líquido cefalorraquídeo de pacientes de esclerosis lateral amioatrófica en rata como modelo de difusión de la enfermedad

• Autores: Lidia Moreno Jiménez
• Directores de la Tesis: Ulises Alfonso Gómez Pinedo (dir. tes.), Jorge Matías-Guiu Guía (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2022
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Miguel Angel Pozo García (presid.), Elpidio Calvo Manuel (secret.), María Cruz Rodríguez-Bobada González del Campo (voc.), Lucía Galán Dávila (voc.), Francisco Javier Sancho Bielsa (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Investigación Biomédica por la Universidad Complutense de Madrid
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología animal (zoología)
      • Histología animal
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Docta Complutense
• Resumen
  • español

    La ELA es un desorden neurodegenerativo, progresivo e incapacitante, caracterizada por la degeneración de las motoneuronas superiores e inferiores. La neuropatología asociada a esta enfermedad presenta diferentes aspectos, como pueden ser la degeneración de las motoneuronas, las inclusiones intracitoplasmáticas y la neuroinflamación. El diagnóstico de esta patología se realiza a través de los criterios de El Escorial Revisados y Awaji. Una de las pruebas electrofisiológicas utilizadas es el reflejo de Hoffmann o reflejo H. El LCR de los pacientes de ELA ha demostrado ser citotóxico para las motoneuronas en cultivo, lo que hizo plantear que la infusión continua de este LCR intraventricular en roedores sería un buen modelo para estudiar la patología esporádica. Para este estudio, se han diseñado dos modelos animales, uno Agudo y otro Crónico. En el Modelo Agudo se procedió a implantar una mini bomba osmótica, rellena de LCR Control o Citotóxico. Por su parte en el Modelo crónico se implantaron 3 bombas osmóticas, rellenas de LCR Control, No Citotóxico y Citotóxico. Durante todo el estudio, se realizaron EMG para evaluar los cambios en el reflejo H. A los animales del Modelo Crónico se les realizaron pruebas de comportamiento. Posteriormente, se procedió al sacrificio de los animales para realizar los estudios neuropatológicos. Tras ello, se realizaron inmunohistoquímicas para evaluar, tanto el proceso neurodegenerativo, como el proceso neuroinflamatorio. Los resultados histológicos han mostrado que tanto en el Modelo Agudo como en el Modelo Crónico existe un proceso neuroinflamatorio activo, tanto en la corteza motora como en la médula espinal. Por otro lado, se evidenció un proceso neurodegenerativo además de un aumento de las inclusiones intracitoplasmáticas. Los resultados electrofisiológicos han demostrado que existe alteración de las ondas M y H. Se observan alteraciones en tanto en la onda M indicativo de una pérdida motora directa, así como en la onda H lo que indica alteraciones en las sinapsis con las neuronas aferentes. Los animales del Modelo Crónico no mostraban alteraciones clínicas, indicativo de que estos animales no presentaban alteraciones funcionales en este periodo de estudio. Actualmente no existe ningún modelo animal que represente en su totalidad a la patología de la ELA. Es por ello, que la búsqueda de un modelo que represente a la patología esporádica es de vital importancia. El principal hallazgo encontrado es una activación del proceso neuroinflamatorio, así como una marcada neurodegeneración. Estos dos hallazgos son dos de las principales características observadas en los pacientes de ELA, así como en los modelos animales. Así mismo, se encuentran alteraciones electrofisiológicas que correlacionan con la degeneración neuronal observada en los resultados histológicos. Estos resultados corroboran lo encontrado en los pacientes de ELA, así como en modelos animales en los que se observan alteraciones en este reflejo y en otros estudios electrofisiológicos. Por último, la infusión del LCR en el ventrículo lateral durante el periodo de estudio no altera la clínica de los animales, lo que indicaría que estos animales podrían encontrarse en una fase presintomática de la patología. Como conclusiones podemos decir que el líquido cefalorraquídeo de algunos pacientes de ELA es citotóxico para las motoneuronas en cultivo. La infusión ICV continua, tanto aguda como prolongada de LCR citotóxico de pacientes de ELA en rata provoca alteraciones histológicas en la corteza motora y en los segmentos cervicales y lumbares de la médula espinal compatibles con lo hallado en la patología humana. Además, provoca alteraciones electrofisiológicas en las motoneuronas espinales que correlacionan con la histología. Así mismo, no provoca alteraciones clínicas ni en la coordinación motora ni en la fuerza de los animales, por lo que se considera que es un modelo de difusión de la patología, pero no la causante de ella

  • English

    Amyotrophic lateral sclerosis is a progressive and disabling neurodegenerative disorder characterized by degeneration of the upper motor neurons of the cerebral cortex, the lower motor neurons of the brain stem and motor neurons of the spinal cord. The age of onset of this disease is variable; generally, it usually originates in adulthood, around 40-60 years of age.The neuropathology associated with this disease presents different aspects such as motor neuron degeneration, intracytoplasmic inclusions and neuroinflammation characterized by increased microgliosis and astrogliosis in both motor cortex and spinal cord. The mechanisms underlying the onset of this disease are currently unknown; however, research carried out in recent years has made it possible to determine certain mechanisms involved in ALS, including oxidative stress, deregulation of axonal trafficking, glutamate-mediated excitotoxicity, alterations in ARN metabolism and alterations in protein homeostasis...