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Resumen de Desarrollo de un modelo experimental de cultivo primario de hepatocitos de rata adulta en ausencia de suero bovino fetal

María José Gómez Lechón-Moliner

  • LA PRESENCIA DE SUERO BOVINO FETAL (SBF) CONSTITUYE UNA LIMITACION EXPERIMENTAL EN LOS CULTIVOS DE HEPATOCITOS CONVENCIONALES. SIN EMBARGO EL SBF CUMPLE UNA FUNCION MEDIANTE LA ADHESION Y ECTENSION CELULAR SOBRE EL SOPORTE PARA CULTIVO Y APORTANDO NUTRIENTES. SE HA ESTUDIADO ESTE PAPEL DE SBF EN CADA UNA DE LAS DIFERENTES ETAPAS DEL CULTIVO Y EN QUE MEDIDA ES SUBSTITUIBLE POR FACTORES ESPECIFICOS SERICOS O NO SERICOS EN CADA UNA DE ELLAS. EL MODELO EXPERIMENTAL DE CULTIVO DE HEPATOCITOS DE RATA ADULTA SE BASA EN: 1) EL AISLAMIENTO DE LOS HEPATOCITOS POR PERFUSION DEL HIGADO MEDIANTE UN TRATAMIENTO QUE OCASIONE EL MINIMO DAÑO CELULAR. 2) LA UTILIZACION DE FIBRONECTINA DE SUEROS DE DIFERENTES ESPECIES ANIMALES COMO SOPORTE PARA CULTIVO Y 3) EL DISEÑO DE UN MEDIO DE CULTIVO QUE LO FAVOREZCA EN CADA UNA DE SUS ETAPAS. EN ESTE SENTIDO ES NECESARIO EL MEDIO HAM F-12 QUIMICAMENTE DEFINIDO COMPLEMENTADO CON DEXAMETASONA E INSULINA PARA MANTENER LA FUNCIONALIDAD ADULTA A LO LARGO DE LOS DIAS DE CULTIVO Y CON GLUCAGGON Y ALBUMINA PARA ASEGURAR LA COMPLETA EXTENSION CELULAR SOBRE EL SOPORTE.


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