Valoración in vivo, mediante el ensayo cometa, del daño y reparación del DNA, en tejidos sólidos
- Autores: María del Pilar Carrera Agudo
- Directores de la Tesis: Jorge Fernández López-Sáez (dir. tes.), Matilde Hernández Navarrete (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2000
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Felipe Cortés Benavides (secret.), Consuelo de la Torre García Quintana (voc.), Nicolás Jouve de la Barreda (voc.), Arturo Pérez Eslava (voc.)
- Materias:
- Texto completo no disponible (Saber más ...)
- Resumen
Durante años se han empleado diversas tecnicas citogeneticas para valorar el daño en el DNA producido por los agentes quimicos y fisicos. Una de las tecnicas más novedosas es la denominada Ensayo Cometa o Electroforesis de nucleos aislados en microgeles de agarosa.
Esta metodologia fue descrita por primera vez por Singh en 1988 y consiste en estudiar el daño genomico en nucleos interfasicos.
En esta Tesis se ha valorado la radiación ionizante (rayos y) y los agentes alquilantes (Etil-Metan-Sulfonato-EMS) como fuentes de daño de origen fisico y quimico, respectivamente, en condiciones in vivo, comparando material animal (Mus musculus) y vegetal (Allium cepa), y utilizando tejido sólido en ambos casos.
Los objetivos propuestos en el desarrollo de esta Tesis han sido, por una parte, la puesta a punto de la tecnica para tejido solido procedente de ambos organismos. En segundo lugar, el estudio in vivo en material animal del efecto de la radiacion y en dos tipos celulares procedentes de distinto tejido (tejido hepatico y sangre circulante) y por ultimo la valoracion en material vegetal del efecto de la radiacion ionizante y los agentes alquilantes, y valorando el efecto del post-tratamiento con cafeina como agente antirreparador.
Los resultados indican que los hepatocitos son más sensibles al daño por radiación y que los leucocitos. Paralelamente, en material vegetal, los núcleos manifiestan mas daño con radiación y que con EMS.
Por otra parte, el post-tratamiento con cafeina confirma la acción antirreparadora que tiene, especialmente con el EMS, y la caracteristica de poner de manifiesto un daño que aparentemente no existe.
Desde el punto de vista práctico, el Ensayo Cometa está siendo aplicado en numerosos campos de la biología, ensayos clinicos y genotoxicidad,en general, lo que la convierte en una tecnica muy valiosa.
