Inhibición de proliferación celular en eucariotas y activación de apoptosis en células humanas mediante el control transcripcional independiente de los genes procariotas kis y kid
- Autores: Guillermo Cueva Méndez
- Directores de la Tesis: Ramón Díaz Oreja (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2000
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Margarita Salas Falgueras (presid.), Francisco Antequera Márquez (secret.), Carlos Martinez Alonso (voc.), Víctor de Lorenzo Prieto (voc.), Mariano Barbacid Montalbán (voc.)
- Materias:
- Texto completo no disponible (Saber más ...)
- Resumen
Las proteínas procariotas Kis y Kid permiten el mantenimiento estable del plásmido R1 en E. coli. Kid es un inhibidor del inicio de replicación de ADN en bacterias y su actividad está neutralizada, en condiciones normales, por su antídoto inestable Kis. En E.coli, ambas proteínas son sintetizadas a partir de un promotor bicistrónico, denominado parD. En el presente trabajo el autor determina que las proteínas Kis y Kid son funcionales en organismos eucariotas (concretamente en S. Cerevisiae, X. laevis y células HeLa).
In vivo, Kid impide la progresión normal de la fase S del ciclo celular en estos organismos y por tanto inhibe su proliferación. Este efecto inhibidor es neutralizado en presencia de Kis. In vitro, Kid inhibe la replicación de ADN en extractos de oocitos de X. Laevis, otro efecto neutralizado en presencia del antídoto Kis. La activación de la toxicidad de Kid en eucariotas puede lograrse in vitro mediante la regulación transcripcional independiente de los genes kis y kid. Además, el caso de células HeLa, la activación de dicha toxicidad tiene como consecuencia la muerte de las mismas por apoptosis.
En este trabajo se analiza también el mecanismo de acción de la proteína Kid a nivel molecular, utilizando E.coli como organismo modelo. Los resultados de este análisis permiten concluir que DnaB, la principal helicasa replicativa de este organismo, es tan sólo parte de la diana celular de la proteína Kid, siendo necesario otro factor de naturaleza desconocida para que Kid ejerza su acción tóxica con eficiencia.
Los resultados obtenidos en este trabajo permiten concluir el potencial de Kis y Kid de la aproximación experimental empleada en el mismo para regular la activación de la toxicidad de la primera en organismos eucariotas in vitro para el desarrollo de futuras estrategias terapeuticas para combatir el cáncer.
