Resumen de Estandarización, validación y establecimiento de valores de referencia en electroforesis capilar urinaria en perros sanos. Comparativa con enfermos renales
Estandarización, Validación y Establecimiento de Valores de Referencia en Electroforesis Capilar Urinaria en Perros Sanos. Comparativa con Enfermos Renales.
Los objetivos de este trabajo son los de establecer unos intervalos de referencia en orina de perros sanos mediante electroforesis capilar e identificar posibles diferencias significativas en las diferentes fracciones de los proteinogramas urinarios de individuos sanos e individuos con enfermedad renal asociada, o no, a infección por Leishmania infantum. Se obtuvieron muestras de orina de 123 perros sanos, de tres rangos de edad diferentes, desde diciembre de 2016 hasta abril de 2019. Tras concentrar y dializar las muestras de orina se migraron 4 mL de orina para la obtención posterior de un proteinograma urinario en el analizador MiniCap Sebia que se dividió en 5 fracciones (F). Los rangos de referencia fueron obtenidos (Reference value advisor v.2.0; Microsoft) mediante métodos no paramétricos con un intervalo de confianza del noventa por cien (90%CIs). Se compararon las variables del grupo sano y los grupos de animales enfermos mediante el programa R versión 3.4.3 (R Development Core Team). El test Anderson-Darling (p>0,05) fue utilizado para comprobar la hipótesis de normalidad. La comparación de las distintas fracciones del proteinograma entre grupos fue determinado utilizando el test ANOVA. La relación entre el valor UPC y las distintas fracciones urinarias se estableció mediante regresión lineal. La relación entre las distintas fracciones del proteinograma sérico y urinario de individuos con patología renal se determinó mediante regresión lineal. Se obtuvieron los siguientes rangos de referencia en porcentaje para la población de perros sanos 5,5 – 56,2% para F1, 3,2 – 16,5% para F2, 3,5 – 16,2% para F3, 17,8 – 69,8% para F4 y 5,1 – 23,9% para F5. Para los rangos de referencia en valores absolutos (mg/L) se obtuvieron los siguientes resultados: 2,49-138 mg/L para F1, 0,87-36,3 mg/L para F2, 1,23-33,5 mg/L para F3, 6,68-182 mg/L para F4 Y 2,32 – 51,5 mg/L para F5. Se encontraron diferencias estadísticamente significativas en el grupo de individuos sanos respecto a la edad en las fracciones F2 (p = 0,01) y F3 (p = 0,02) y respecto al sexo en la fracción F1 (p = 0,03). La comparativa de la población de sanos frente al total de enfermos reveló diferencias estadísticamente significativas para las fracciones F2 (p = 0,00), F3 (p = 0,00) y F4 (p = 0,00). La comparativa de los tres grupos de individuos entre si, reveló diferencias estadísticamente significativas en la F2 (p = 0,00), F3 (p = 0,00), F4 (p = 0,00) y F5 (p = 0,00). No se encontró correlación entre el valor del UPC y las distintas fracciones del proteinograma urinario en la totalidad de la población de animales enfermos, así como tampoco se detectó correlación entre las distintas fracciones del proteinograma sérico y urinario de los individuos enfermos evaluados. Los valores de referencia obtenidos concuerdan con la excreción de proteínas en orina de perros sanos estudiadas mediante otras técnicas electroforéticas, no obstante, no existen estudios de rangos de referencia en orina de perros realizados mediante ningún método electroforético. Las diferencias en las distintas fracciones tanto en animales sanos como en animales enfermos concuerdan con los estudios realizados hasta la fecha donde se asocia a ciertas patologías a la excreción de diferentes proteínas, no obstante estudios con una población más grande y grupos más definidos serían necesarios. Mediante electroforesis capilar urinaria no es posible la identificación de las diferentes proteínas contenidas en cada fracción urinaria por lo que estudios asociados a técnicas de inmunotipado y/o inmunofijación serían de interés.
