Role of capicua-l rtk signaling and endocycle regulation

• Autores: Laura Rodríguez Muñoz
• Directores de la Tesis: Gerardo Jiménez Cañero (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat de Barcelona ( España ) en 2021
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Talila Volk (presid.), Sofia Jorge (secret.), Xavier Franch Marro (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Genética por la Universidad de Barcelona
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología celular
    • Biología molecular
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: TDX
• Resumen

  • La proteína HMG-box Capicua (Cic) es un represor transcripcional conservado con funciones clave debajo de la vía de señalización receptor tirosina kinasa (RTK)-Ras- MAPK. Tanto en Drosophila como en mamíferos, Cic se expresa como dos isoformas Cic-S y Cic-L, las cuales difieren en su extremo N-terminal. Sin embargo, no conocemos la relevancia de esta diferencia, o si es posible que Cic-S y Cic-L tengan funciones o regulaciones distintas. Esto es debido a que hasta ahora la mayoría de los estudios se han centrado en la isoforma corta, o han usado aproximaciones que no permiten discernir entre ambas isoformas. Para abordar esta cuestión, hemos comparado la expresión de las dos isoformas de Cic durante el desarrollo de Drosophila y hemos generado mutaciones mediante la técnica de CRISPR/Cas9 que inactivan esta isoforma selectivamente. Hemos encontrado que Cic-L actúa de forma redundante con Cic-S en procesos regulados por señales RTK como son la especificación de las venas del ala y el establecimiento de la polaridad dorsoventral del embrión. Además, Cic-L ejerce funciones únicas durante la oogénesis regulando el crecimiento y el desarrollo de células de la línea germinal. En concreto, durante las etapas 8-9 Cic-L empieza a acumularse en los núcleos de las células nutricias, donde es necesaria para que estas células puedan salir del endociclo y transferir sus contenidos citoplasmáticos al oocito (proceso denominado dumping). Puesto que hemos encontrado que la salida del endociclo es previa al inicio del dumping, hemos propuesto que la salida del endociclo inducida por Cic-L, es lo que determina el inicio del proceso de dumping. Cic-L ejerce este control, como mínimo en parte, a través de promover la estabilización de Ciclina E, cuyas oscilaciones son imprescindibles para la progresión del endociclo, y la regulación a la baja de Myc, un factor promovedor del crecimiento. Además, hemos encontrado que las funciones únicas de Cic-L dependen principalmente de su región N-terminal propia, la cuál contiene tres dominios conservados-NLS, Tudor-like y N1-que contribuyen de forma aditiva a la función de Cic-L. En cambio, otros dominios compartidos con Cic-S, como los dominios de unión a DNA HMG-box y C1 y el dominio C2, implicado en la inactivación de Cic por MAPK, son en gran parte dispensables para las actividades propias de Cic-L. Por último, hemos visto que algunas especies de metazoos basales como las esponjas contienen variantes truncadas de Cic-L (Proto-Cic) constituidas únicamente por secuencias de la región N-terminal de Cic-L. Por la tanto, la región N-terminal de Cic-L lleva a cabo funciones inesperadas en crecimiento celular y endoreplicación que podrían parecerse a las actividades de proteínas Cic ancestrales.