Estructura del coronavirus de la gastroenteritis porcina transmisible y encapsidación de su genoma

• Autores: David Escors
• Directores de la Tesis: Luis Enjuanes (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2002
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: José Francisco Parra Fernández (presid.), Mauricio García Mateu (secret.), Amelia Nieto Martín (voc.), María rosa Estaban Cañibano (voc.), José Antonio Melero Fondevilla (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología molecular
    • Virología
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• Resumen

  • El virus de la gastroenteritis porcina transmisible (TGEV) es un miembro de la familia de los coronavirus y contiene un RNA genómico de 28.5 kb unido a la proteína N, formando una nucleocápsida helicoidal que a su vez se organiza en una cápsida interna esférica. La cápsida está envuelta por la membrana del virus en la que se encuentran la proteína S, que forma la peplómeros del virus, la proteína E (de envuelta) y la proteína M (de membrana). En 1996 nuestro grupo identificó una cápsida interna del virus, compuesta por el RNA del virus y las proteínas estructurales N y M. Este resultado fue inesperado dado que la proteína M es una proteína integral de membrana, y con el objetivo de explicarlo se llevó a cabo esta tesis doctoral. Durante la tesis se ha demostrado que existen dos poblaciones de moléculas de proteína M en la envuelta del virus, atendiendo a la topología que adoptan. Dos tercios de las moléculas adoptan una topología Nexo-Cendo, es decir, con el extremo amino de la proteína expuesto en la superficie del virión y el extremo carboxilo en el interior, y un tercio en topología Nexo-Ceno, con los extremos amino y carboxilo expuestos en la superficie del virión. Se demostrón que el extremo carboxilo de la proteína Nexo-Cendo forma parte estructural de la cápsida interna, ya que interacciona con ella y estabiliza su estructura. Al eliminarse la proteína M de las cápsidas purificadas, estas se desensamblaron dando lugar a la nucleocápsida helicoidal del virus. En cambio, la proteína M con topología Nexo-Cexo se pierde durante la disolución de la envuelta del virus debido a que expone el extremo carboxilo en la superficie del virión. Adicionalmente se estudiaron las posibles modificaciones post-traduccionales de la proteína de la nucleocápsida (N) en las distintas estructuras del virus. Se encontraron dos posibles fosforilaciones en la proteína N, una de ellas presente en todas las estructuras del v