Resumen de Targeting the rb pathway in tumor cells
La proteína de Retinoblastoma (RB) es un regulador negativo del ciclo celular. En respuesta al estrés ambiental, p38 MAPK fosforila a RB en la región N-terminal, lo que aumenta la afinidad de RB por E2F, reprimiendo la expresión génica y deteniendo el ciclo celular. La expresión de un mutante RB p38-fosfomimético disminuye la proliferación de células cancerosas y tumores en ratones. En esta tesis, hemos diseñado un ensayo que monitoriza la actividad de RB en células para identificar compuestos que mimetizan el efecto de la fosforilación de RB por p38. Este ensayo se ha optimizado para cribado de alto rendimiento (HTS) y hemos analizado más de 9.000 compuestos diferentes. Identificamos 32 compuestos activos (hits) que se clasificaron según su mecanismo de acción mediante ensayos secundarios. Nuestros datos indicaron que 11 fármacos inhiben el crecimiento de células tumorales y 7 de ellos detienen el ciclo celular en G1. De estos 7 compuestos, uno activó p38, otro es un inhibidor de la CDK4 y 2 aumentaron la afinidad de E2F-RB. También hemos identificado una región de interacción RBN-E2F1 más pequeña, lo que nos está ayudando a caracterizar el impacto de los hits con mayor precisión. Actualmente, estamos realizando un ensayo HTS con bibliotecas químicas más grandes y novedosas. Los compuestos identificados en esta tesis ofrecen una prometedora estrategia terapéutica antitumoral aplicable a la mayoría de los tipos de cánceres.
