Actividad protectora de la melatonina en las membranas celulares y mitocondriales durante la isquemia y reperfusión hepática
- Autores: Eduardo Esteban Zubero
- Directores de la Tesis: José Joaquín García García (dir. tes.), Laura López Pingarrón (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Zaragoza ( España ) en 2021
- Idioma: español
- Materias:
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- Resumen
El estrés oxidativo genera daño en los lípidos y proteínas, principales constituyentes de las membranas biológicas. La melatonina (MEL) tiene una potente actividad antioxidante que ejerce, bien neutralizando radicales libres por cesión electrónica, bien estimulando la actividad y expresión de las enzimas antioxidantes. En el presente trabajo, se evaluó el efecto de la indolamina en un modelo in vivo de isquemia-reperfusión (I-R) hepática en la rata. Para ello, 40 ratas macho raza Sprague-Dawley (225-250 g) se distribuyeron en cuatro grupos: Control (n=10), isquemia (n=10), I-R (n=10), y MEL tras I-R (n=10). La isquemia se realizó mediante la maniobra de Pringle, consistente en oclusión de la arteria hepática y de la vena porta. Se utilizaron 20 minutos de isquemia y 30 minutos de reperfusión. La MEL (50 mg/kg, intraperitoneal) se administró 30’ antes del inicio de la isquemia vascular. El daño en las membranas celulares y mitocondriales se valoró mediante los cambios en su fluidez, por espectroscopía de fluorescencia con TMA-DPH como marcador, y por la determinación de las concentraciones de malonildialdehido y 4-hidroxialquenales y de la carbonilación proteica, mediante espectrofotometría, indicadores de la oxidación de lípidos y proteínas, respectivamente. Dado que el óxido nítrico está implicado en el daño oxidativo por I-R, también se valoró si la MEL podía reducir la lesión de las membranas mediada por radicales libres en un sistema que utiliza el nitroprusiato sódico (NPS) como donante de óxido nítrico. Tras realizar los estudios cinéticos de este modelo se utilizó NPS 1 mM y una incubación a 37°C durante 1 hora.
Tras 20 minutos de isquemia no se produjeron alteraciones en la dinámica lipídica en las membranas celulares y mitocondriales ni se observaron signos de lesión oxidativa en los lípidos y proteínas del tejido hepático. La reperfusión vascular durante 30 minutos tras la maniobra de Pringle causó una marcada caída de la fluidez en las membranas celulares y mitocondriales y elevación de los marcadores de lesión oxidativa en lípidos y proteínas, lo que sugiere que los radicales libres pueden ser los responsables, al menos parcialmente, de la rigidez en las membranas hepáticas. El tratamiento con MEL preservó el nivel basal de fluidez en las membranas y previno la oxidación de los lípidos y proteínas, causada por la reperfusión.
La exposición in vitro de las membranas celulares y mitocondriales aisladas del tejido hepático de la rata al NPS produjo rigidez en las mismas, a la vez que oxidación de sus constituyentes lipídicos y proteicos, lo que sugiere que ambos fenómenos están relacionados. Estos cambios fueron reducidos por la indolamina de forma concentración dependiente.
Estos resultados refuerzan la necesidad de evaluar el potencial uso terapéutico de la melatonina en los procesos que cursan con I-R, como las patologías vasculares y el trasplante de órganos.
