Analisis de proteinas por electroforesis capilar: nuevos medios de separacion y desarrollo de metodos cuantitativos

• Autores: Alejandro Cifuentes Gallego
• Directores de la Tesis: José Carlos Díez Masa (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Valladolid ( España ) en 1993
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Pedro Sanchez Batanero (presid.), María Jesús del Nozal Nalda (secret.), Manuel Dabrio Bañuls (voc.), Mercedes Ramos González (voc.), Enrique Méndez Cormán (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Química analítica
      • Análisis bioquímico
    • Bioquímica
      • Proteínas
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• Resumen

  • Se ha diseñado y construido, a partir de un detector uv-vis inicialmente diseñado para hplc, una celula para llevar a cabo la deteccion sobre capilares de 25-75 micras de diametro interno (deteccion "on-column"). Se han desarrollado nuevos medios de separacion para el analisis de proteinas por electroforesis capilar de alto voltaje (ecav). Asi, se ha puesto a punto un metodo para recubrir la pared interna del capilar empleando un gel de poliacrilamida entrecruzada que permite la separacion de proteinas basicas en cortos tiempos de analisis con elevadas eficacias. Por otro lado, se ha desarrollado un medio de separacion empleando polietilenglicol como aditivo polimerico al tampon, que posibilita la separacion de proteinas segun su masa molecular. Se ha demostrado el potencial de ecav para el analisis cuantitavo de proteinas en sueros lacteos. Se ha desarrollado y validado un modelo matematico que permite cuantificar las interacciones proteina-capilar. Se han estudiado y comparado diferentes medios de separacion (capilares rellenos con geles de poliacrilamida en condiciones desnaturalizantes y no desnaturalizantes, recubrimientos clasicos de metilcelulosa) en el analisis de proteinas.