Tipificación molecular de brucella de origen humano. Epidemiología molecular

• Autores: Sandra González Cabrero
• Directores de la Tesis: Antonio Orduña Domingo (dir. tes.), María Purificación Gutiérrez Rodríguez (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Valladolid ( España ) en 2011
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Antonio Rodríguez Torres (presid.), Miguel Angel Bratos Pérez (secret.), Juan Luis Muñoz Bellido (voc.), Juan García Lobo (voc.), María Beltrán Dubón (voc.)
• Materias:
  • Ciencias médicas
    • Epidemiología
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: TESEO
• Resumen

  • La Brucelosis es una zoonosis producida por una bacteria del género Brucella. En España hoy en día se siguen generando pequeños brotes de esta enfermedad por lo que es importante conocer el origen de la infección. Para estudiar la epidemilogia, las técnicas moleculares son una herramienta excelente ya que nos dan información que las técnicas convencionales de identificación no nos proporcionan. En nuestro estudio se han utilizado 189 cepas recuperadas de una colección de Brucella de origen humano que data de 1974 hasta 2007. Los resultados iniciales nos muestran el 100% de concordancia entre las técnicas genómicas y las técnicas convencionales en la identificación de Brucella, identificandose el 96,8% de las cepas como Brucella melitensis y el 3,2% como Brucella abortus. A la vista de estos resultados nos inclinamos por el uso de técnicas genómicas para la identificación de Brucella por su rapidez y facilidad de interpretación. Al caracterizar mediante la técnica MLVA (análisis de regiones repetidas de número variable) dichas cepas, hemos encontrado 26 genotipos de los cuales 18 han sido descritos por primera vez en este estudio. Estos nuevos genotipos tienen relación SLV (simple locus variante) o DLV (doble locus variante) con algún genotipo ya descrito. El genotipo 42 ha sido uno de los mayoritarios en este estudio identificándole en Castilla y León desde 1974, junto con los nuevos genotipos 42-1, 42-2, 42-3 y 42-4. El genotipo 60 es la primera vez que se identifica en España. Este genotipo y sus variantes 60-1, 60-2, 60-3, 60-4, 60-5 y 60-6 han sido encontrados unicamente en Extremadura. Castilla y León y Extremadura comparten diversos genotipos, lo que podría explicarse por la proximidad geográfica y la práctica de transhumancia entre ambas comunidades. En cepas identificadas como Brucella abortus se ha identificado el genotipo 36 siendo la primera vez que se informa de este genotipo en cepas de origen humano. Para una mejor caracterización de las cepas se realizó PFGE no encontrandose relación entre esta técnica y el MLVA, por lo que recomendamos la técnica MLVA para estudios de epidemiología del género Brucella. Al realizar el estudio poblacional mediante la secuenciación de genes housekeeping utilizando la técnica MLST (tipificación mediante secunciación de multiples locus) obtuvimos dos nuevos alelos, el alelo 11 para el gen glk, y el alelo 7 para el gen gyrB. La aparición de estas nuevas secuencias nos ha permitido describir dos nuevas secuencias tipo (ST) ST28 y ST29. El ST28 está vinculado al genotipo 60 y el ST29 al genotipo 43. Estas STs tienen la misma línea evolutiva que el ST8, encontrado de forma predominante en nuestro estudio y vinculado al genotipo 42 y dos de sus variantes. Todas estas STs, junto con la ST7 tienen un origen común, el ST11. Este ST11 está vinculado al genotipo 51, por lo que nosotros pensamos que el genotipo 51 podría ser el ancestro de todos los genotipos identificados en las cepas de Brucella melitenis. En base a los resultados obtenidos pensamos que los nuevos genotipos y las nuevas STs descritas en este trabajo pueden ser propios de nuestro país.