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Producció d'antígens recombinants de toxoplasma gondii en soques escherichia coli editades genèticament

  • Autores: Adrià Dídac Redondo Jimenez
  • Directores de la Tesis: Joan Bertran Comulada (dir. tes.)
  • Lectura: En la Universitat de Vic - Universitat Central de Catalunya ( España ) en 2020
  • Idioma: español
  • Tribunal Calificador de la Tesis: Raúl Estevez Povedano (presid.), Marc Llirós Dupré (secret.), Marta Pineda Riu (voc.)
  • Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Ciencias Experimentales y Tecnologías / Experimental Sciences and Technology por la Universidad de Vic-Universidad Central de Catalunya
  • Materias:
  • Texto completo no disponible (Saber más ...)
  • Resumen
    • La toxoplasmosis es crítica en mujeres embarazadas debido a su transmisión a los fetos. La diagnosis por métodos serológicos depende del lisado heterogéneo del parásito Toxoplasma gondii, difícil de estandarizar y con alto coste de producción. En cambio, los antígenos recombinantes de Toxoplasma gondii son muy útiles para la detección de anticuerpos y pueden ser producidos de manera asequible en Escherichia coli. Además, los avances en el sistema CRISPR-Cas9 facilitan la edición de su genoma. Esto permite conseguir cepas editadas genéticamente con ventajas respecto a las cepas transformadas con plásmido. En esta tesis se presentan cepas de Escherichia coli que se han generado, vía transformación con plásmido o vía edición genética, para producir los antígenos de Toxoplasma gondii SAG2, GRA2, ambos, o la nueva proteína quimérica SAG2-GRA2. También se demuestra que estos antígenos son útiles para el desarrollo de inmunoensayos, siendo la proteína quimérica la que obtiene mejores resultados.

      Toxoplasmosis is critical in pregnant women because of its transmission to the fetuses. Diagnosis by serological methods mainly relies on heterogeneous Toxoplasma gondii lysates, which is hard to standardize and with high cost. Recombinant Toxoplasma gondii antigens are very useful for antibody detection in serum samples and they can be produced affordably in Escherichia coli. Besides, the breakthrough of the CRISPR-Cas9 system facilitates genome editing in many organisms, including Escherichia coli. This has allowed establishing genome-edited strains with advantages compared with expression from plasmid-transformed strains. Here in this dissertation, it is presented strains of Escherichia coli that have been generated, by plasmid transformation or by genome editing, to produce the Toxoplasma gondii antigens SAG2, GRA2, both or the novel chimeric protein SAG2-GRA2. Also, it is shown that such antigens are useful in immunoassay development, being the chimeric protein the one with better results.


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