Validación de técnicas para el desarrollo de un sistema multidiagnóstico de la leishmaniosis visceral por leishmania infantum
- Autores: Adela Gómez Luque
- Directores de la Tesis: Juan Carlos Parejo Rosas (dir. tes.), Virginia Iniesta Orozco (codir. tes.), Luis Carlos Gómez Nieto (codir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Extremadura ( España ) en 2021
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: David Reina Esojo (presid.), Jesús María Viñuelas Bayón (secret.), Maria Setefilla Martinez Cruz (voc.)
- Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Salud Pública y Animal por la Universidad de Extremadura
- Materias:
- Enlaces
- Tesis en acceso abierto en: Dehesa
- Resumen
Introducción: El diagnóstico de la leishmaniosis canina (L. Can) por Leishmania infamtum, es complejo por el largo periodo de incubación, la existencia de portadores inaparentes capaces de trasmitir el parásito a los vectores y por la necesidad de utilizar diferentes técnicas diagnósticas, inmunológicas y moleculares, para la detección precoz.
Objetivos: Los objetivos generales planteados fueron: a) Validar las técnicas aplicadas al diagnóstico de la LCan, ELISA SLA IgG2, IFI y Real Time PCR (qPCR); b) desarrollar un sistema de diagnóstico múltiple para la detección y seguimiento de perros infectados por L. infantum.
Material y métodos: Para la validación de ELISA SLA IgG2 e IFI, se utilizaron muestras de suero sanguíneo procedentes de 116, y 96 perros respectivamente y para qPCR, 44 muestras de médula ósea y ganglio linfático. Se estudiaron los atributos linealidad, exactitud, especificidad, sensibilidad, precisión, límite de detección y cuantificación, robustez y estabilidad.
Para la consecución del segundo objetivo, se ha desarrollado un sistema de diagnóstico múltiple utilizando muestras no invasivas, pelo, hisopados (cerumen-mucosas-piel) y sangre seca adherida a papel Whatman, cuyo dosier se incluye en esta Tesis Doctoral y cuyos resultados de aplicación, se discuten mediante dos artículos publicados.
Resultados y conclusiones: Se evidencia que nuestros métodos diagnósticos estandarizados, ELISA, IFI y qPCR, son altamente fiables, sensibles y específicos. Estas técnicas han servido de referencia para el desarrollado MultiLeish 5D, un sistema de diagnóstico múltiple para la detección y seguimiento de la LCan, que permite a los profesionales veterinarios el diagnóstico en las diferentes fases y estados de la patocronia, primoinfectados, latentes evolutivos y patentes.
