Mecanismos del proceso neurodegenerativo en el ratón "harlequin": una aproximación proteómica y posibles alternativas terapéuticas en las enfermedades mitocondriales

• Autores: Miguel Fernández De la Torre
• Directores de la Tesis: María Morán Bermejo (dir. tes.), Isabel Lastres Becker (tut. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2021
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: José Luis Trejo Pérez (presid.), Fernando Bartolomé Robledo (secret.), Laura Contreras Balsa (voc.), Albert Quintana Romero (voc.), Patricia Boya Tremoleda (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Neurociencia por la Universidad Autónoma de Madrid
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
  • Ciencias de la vida
    • Fisiología humana
      • Fisiología del ejercicio
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  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen

  • Las enfermedades mitocondriales (EM) son un grupo heterogéneo de trastornos de origen genético causados por una disfunción del sistema de fosforilación oxidativa (OXPHOS). Los tejidos con mayores requerimientos energéticos, como el tejido nervioso, son los más susceptibles a la EM, siendo las neuronas un tipo celular particularmente vulnerable a la inestabilidad del sistema OXPHOS y al estrés oxidativo. Hasta la fecha, las opciones terapéuticas de las EM se limitan al tratamiento sintomático y, a excepción de algún caso particular, no existe una terapia efectiva para éstas en la actualidad. Aunque los síntomas neurológicos son frecuentes en la mayoría de las EM, los mecanismos fisiopatológicos implicados en la muerte neuronal (secundarios al fallo mitocondrial) son aún poco conocidos.

    Los objetivos principales de la presente tesis doctoral fueron: i) evaluar el posible efecto neuroprotector de un programa de entrenamiento físico, y ii) profundizar en las causas del proceso neurodegenerativo para identificar nuevas dianas farmacológicas en el tejido nervioso del ratón Harlequín (Hq).

    Para ello, se analizó el impacto de un programa de entrenamiento combinado de fuerza, resistencia y coordinación de 8 semanas de duración sobre el cerebelo de ratones macho wild-type (WT) y Hq. Además, para profundizar en los mecanismos de enfermedad, se realizó i) un estudio proteómico en el cerebelo de los ratones sanos y enfermos, seguido de un análisis mediante biología de sistemas, ii) un estudio de evolución de los mecanismos fisiopatológicos en el ratón Hq, y iii) un análisis de cultivos de astrocitos y células de la microglía del cerebelo de ratones WT y Hq, y de células mieloides HAP1 con un déficit en AIF, obtenidas por tecnología CRISPR/Cas9.

    El presente estudio mostró que, a pesar de las mejoras en la capacidad aeróbica y en la fuerza muscular, la intervención con entrenamiento no ejerció un efecto neuroprotector en el cerebelo del ratón Hq. El análisis proteómico y de biología de sistemas evidenció que, más allá de la disfunción del complejo I y la desregulación del sistema OXPHOS, el cerebelo del ratón Hq presentaba signos de estrés oxidativo y de activación de las células gliales, junto a la identificación de nuevas alteraciones en los mecanismos de neurotransmisión glutamatérgica y GABAérgica, evidencias de hiperamonemia y una regulación negativa del mecanismo de plasticidad sináptica conocido como “depresión a largo plazo”. De manera complementaria, este estudio mostró que el déficit de AIF en las células mieloides HAP1 condujo a alteraciones en el importe de subunidades OXPHOS a la mitocondria y en la formación del respirasoma, variaciones en el estado bioenergético, cambios ultraestructurales en la morfología mitocondrial, mayor susceptibilidad a la muerte por estrés oxidativo y una activación simultánea de las vías de señalización AMPK y mTOR, sin un impacto final sobre la autofagia.

    Este estudio ha proporcionado nuevas evidencias sobre los mecanismos fisiopatológicos asociados con la degeneración cerebelosa en el ratón Hq y propone alternativas terapéuticas previamente desconocidas para el tratamiento de la ataxia y la neurodegeneración en el contexto de las EM, como el aporte de sustratos anapleróticos del ciclo de Krebs, que podrían aplicarse potencialmente en otros trastornos neurodegenerativos.