Role of nfat5 in macrophage polarisation
- Autores: Mónica Tellechea Recarte
- Directores de la Tesis: Cristina López Rodríguez (dir. tes.), Maria Buxadé Fortuny (codir. tes.)
- Lectura: En la Universitat Pompeu Fabra ( España ) en 2017
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Ángel Luis Corbi Lopez (presid.), Susana de la Luna Gargantilla (secret.), Annabel Fernández Valledor (voc.)
- Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Biomedicina por la Universidad Pompeu Fabra
- Materias:
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- Resumen
Los macrófagos son células del sistema inmunitario innato que se encuentran en todos los órganos. En los tejidos, los macrófagos actúan para mantener la homeostasis cambiando rápidamente entre estados inflamatorios y antiinflamatorios para responder eficientemente a las perturbaciones que suceden en su entorno. Esta plasticidad funcional requiere la expresión coordinada de genes que están regulados por factores que aún no han sido completamente caracterizados. En este trabajo se quería estudiar la contribución del factor de transcripción NFAT5, previamente caracterizado como un factor de respuesta a estrés osmótico, como regulador de las funciones de los macrófagos en diferentes condiciones de polarización.
Para ello, generamos macrófagos clásicamente activados con IFNγ (M1) y activados de manera alternativa con IL-4 (M2), wild-type (WT) y deficientes en NFAT5, y analizamos la expresión de marcadores M1 y M2 a nivel de RNA, ELISA y Western Blot. Observamos que la expresión de marcadores M1 como Nos2, Il1b y Il12b estaba claramente afectada en los macrófagos deficientes en NFAT5, mientras que los diferentes marcadores M2 analizados presentaban distintos niveles de dependencia en NFAT5. Así, NFAT5 era necesario para la expresión de genes tales como Arg1 y Relma, mientras que no lo era Mrc1.
Estudiamos también la capacidad bactericida y fagocítica de los macrófagos M1 y M2 y observamos que estas funciones se ven afectadas por la falta de NFAT5. Del mismo modo, analizamos la expresión génica de citosinas de linfocitos T CD4+ en co-cultivo con macrófagos singénicos deficientes en NFAT5 y observamos que adquieren un fenotipo más antiinflamatorio (expresan niveles altos de Il4 y bajos de Ifng).
Finalmente, llevamos a cabo ensayos in vitro e in vivo con células tumorales singénicas de pulmón (Lewis lung carcinoma) y de carcinoma de ovario (ID8). Vimos que los macrófagos deficientes en NFAT5 adquieren un fenotipo más protumoral en co-cultivo con estas células, y estas observaciones concuerdan con los resultados in vivo, en los que los macrófagos deficientes en NFAT5 facilitan el desarrollo tumoral.
En resumen, nuestros resultados indican que NFAT5 es necesario para la adquisición de un fenotipo inflamatorio y antitumoral en macrófagos.
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