Estudios estructurales en el inicio de la replicación de la bacteria Gram-positiva Bacillus subtilis
- Autores: Rafael Núnez Ramírez
- Directores de la Tesis: José María Carazo García (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2005
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: José López Carrascosa (presid.), Carmen San Martín Pastrana (secret.), Silvia Ayora (voc.), Alberto Pascual Montano (voc.), Juan Méndez Zunzunegui (voc.)
- Materias:
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- Resumen
El papel principal de las helicasas replicativas durante la replicación cromosómica es proporcionar un ADN molde de cadena sencilla a la maquinaria replicativa. El cargado de la helicasa en el ADN es un paso fundamental en el inico de la replicación. Las helicasas son reclutadas en el ADN gracias a proteínas primosomales que difieren en cada organismo.
En esta tesis se muestran las características estructurales de diferentes complejos macromoleculares que tienen lugar en el inicio de la replicación de la bacteria Gram-positiva Bacillus subtilis.
En primer lugar, se ha obtenido la estructura del complejo helicasa-cargador DnaC-Dnal mediante crio-microscopia electrónica. Este complejo se organiza como una estructura toroidal donde tres dímeros de Dnal se sitúan sobre un anillo hexamérico formado por la proteína DnaC.
En segundo lugar se ha estudiado la estructura de DnaB, el segundo cargador de la helicasa DnaC, mediante diversas técnicas de elucidación estructural. DnaB se organiza como un tetramero asimétrico cuya arquitectura recuerda al a del complejo gamma de Escherichia coli. Esta semejanza, junto con la estructura del complejo DnaC-Dnal, sugiere que el cargado de la helicasa DnaC se realiza mediante el mecanismo de apertura del anillo. Por último, se ha caracterizado tridimensionalmente el polimorfismo cuaternario de la helicasa. G40P ha permitido la localización de los diferentes dominios de esta familia de helicasas así como determinar la implicación de estos en el polimorfismo cuaternario. La transición entre los diferentes estados de simetría ha sido propuesto como mecanismos para la translocación de la helicasa sobre el ADN.
