Bases moleculares de la acidemia metilmalónica aislada efecto de mutaciones sobre la estabilidad de proteínas implicadas en enfermedades metabólicas hereditarias
- Autores: María Ángeles Martínez García
- Directores de la Tesis: Ana Belén González Pérez (dir. tes.), Lourdes Ruiz Desviat (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2005
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Fernando Valdivieso Amate (presid.), Mercedes Martínez Pardo (secret.), Carlos Alonso Blanco (voc.), María G. Medina (voc.), José Fernández Piqueras (voc.)
- Materias:
- Texto completo no disponible (Saber más ...)
- Resumen
El objetivo principal de este trabajo ha sido la caracterización de las bases moleculares de la acidemia metilmalónica aislada (MMA). Con este propósito hemos llevado a cabo el análisis mutacional de 16 pacientes MMA pertenecientes a los grupos de complementación mut (13) y cblA (3), describiendo 11 genotipos distintos (8 mut y 3 cblA). Hemos identificado un total de 19 variantes alélicas distintas en el gen MUT (deficiente en el grupo de complementación mut) que incluyen 16 posibles mutaciones patogénicas y 3 polimorfismos previamente descritos. Doce variantes se han descrito por primera vez en este estudio de las cuales una (A324T) probablemente corresponda a una mutación mut asociada al fenotipo más leve de la enfermedad y otra (I69V) a un polimorfismo o SNP. En el gen MMAA (deficiente en el grupo cblA) hemos detectado 4 mutaciones nuevas, todas responsables de la aparición de codones de parada de traducción prematuros.
Asimismo, hemos estudiado el grado de conservación entre proteínas MCM homólogas de diferentes organismos y realizado el análisis estructural de algunas variantes MUT identificadas con el fin de obtener más información sobre el mecanismo causante de enfermedad. El efecto estructural de las mutaciones missense ha sido estudiado mediante la localización de los diferentes residuos afectados en la estructura 3D del enzima metilmalonil-CoA mutasa en bacterias (subunidad de la MCM de P.shermanii). De esta manera hemos visto que la mayoría de los cambios afectan a residuos muy conservados entre organismos alejados filogenéticamente que probablemente ejercen un papel importante en el plegamiento y mantenimiento de la conformación óptima y estabilidad de la proteína.
En este trabajo también hemos llevado a cabo la expresión de diferentes proteínas mutantes en un sistema in vitro libre de células de transcripción/traducción acoplada con objeto de estudiar la viabilidad de este sistema de expres
