Análisis de las interacciones entre proteínas de la envuelta del virus vaccinia

• Autores: Beatriz Perdiguero Torre
• Directores de la Tesis: Rafael Blasco Lozano (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2004
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: María Dolores Rodríguez Aguirre (presid.), Francisco Sobrino Castelló (secret.), Juan Carlos Saíz Calahorra (voc.), Fernando Almazán Toral (voc.), Fernando Rodríguez González (voc.)
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• Resumen

  • El virus vaccinia pertenece a la familia Poxviridae, subfamilia Chordopoxvirinae y genero Orthopoxvirus. La familia Poxviridae se caracteriza por sus viriones grandes, con forma ovalada o de ladrillo, que contienen las enzimas necesarias para la transcripcion y por replicarse en el citoplasma de la celula infectada.

    El virus vaccinia presenta varias formas virales denominadas IMV o virus intracelular maduro, IEV o virus intracelular con envuelta, CEV o virus extracelular asociado a celula y EEV o virus extracelular con envuelta.

    Existen una seria de proteínas localizadas en las dos últimas envueltas del virus que son: A33R, A34R, A36R, B5R, F12L y F13L responsables en gran medida de los diferentes procesos que tiene lugar durante la morfogénesis y que dan lugar a las diferentes formas virales descritas previamente.

    Del mismo modo es lógico pensar que no solamente la presencia de estas proteínas en la envuelta viral es necesaria sino que deben serlo también las interacciones entre ellas.

    El objeto de esta tessi es la identificacion de interacciones entre estas proteínas de la envuelta. Para ello se han realizado diferentes abordajes experimentales.

    En primer lugar, mediante ensayos de transfección, se han podido identificar interacciones entre A33R-A36R y A33R-B5R y en segundo lugar ,mediante la creacion de una colección de virus recombinantes y la realización de ensayos de inmunoprecipitación, han podido detectarse otra serie de interacciones de las cuales A33R-F13L, A36R-B5R y A34R-A36R no habían sido descritas previamente. Utilizando este mismo tipo de ensayios se ha realizado un mapeo más fino de las regiones de interacción de B5R con el resto de proteínas de la envuelta.

    Por último ,mediante microscopía de fluorescencia, se ha podido determnar la implicación de A33R y A34R en la incorporación a los virus envueltos de F13L y B5R, respectivamente.

    Este complejo conjunto de interacciones determinarían, por