Terapia génica in vivo para la mucopolisacaridosis tipo iva: estudio de la eficacia en una nueva rata modelo de la enfermedad
- Autores: Joan Bertolin Galvez
- Directores de la Tesis: Fàtima Bosch i Tubert (dir. tes.)
- Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 2019
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Mercedes Pineda Marfá (presid.), Lluís Montoliu i José (secret.), María Antonia Blasco Marhuenda (voc.)
- Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Bioquímica, Biología Molecular y Biomedicina por la Universidad Autónoma de Barcelona
- Materias:
- Texto completo no disponible (Saber más ...)
- Resumen
La Mucopolisacaridosis tipo IVA (MPS IVA) es una enfermedad de depósito lisosomal causada por la deficiencia de la enzima N-acetilgalactosamina 6-sulfatasa (GALNS). La ausencia de esta enzima conduce a la acumulación patológica de los glicosaminoglicanos (GAG) Queratán Sulfato (KS) y Condroitín-6-Sulfato.
Actualmente, no existe un modelo animal que mimetice todos los signos clínicos de la MPS IVA humana. Por ello, el objetivo inicial de la presente tesis doctoral fue generar una nueva rata modelo de la MPS IVA introduciendo la mutación missense más frecuente en humanos (c.1156C>T) mediante la tecnología CRISPR/Cas9. Posteriormente, se caracterizó este modelo, el cuál desarrolló los signos típicos de la enfermedad, como alteraciones en el tamaño corporal, pérdida temprana del cartílago articular, hipertrofia de condrocitos, hipoplasia de esmalte, acumulación de GAGs en diferentes órganos y tejidos y una reducción de la esperanza de vida.
Dado que no existe un tratamiento capaz de revertir todas las alteraciones que sufren los pacientes de Morquio A, el siguiente objetivo de la presente tesis doctoral fue el desarrollo de una nueva aproximación de terapia génica para el tratamiento de la MPS IVA. Para ello, se estudió la biodistribución del vector AAV9 tras una administración intravenosa (IV). Los resultados demostraron una alta eficiencia de transducción en huesos, cartílago articular, dientes, órganos y sistema nervioso central (SNC). Por ello, se desarrolló una estrategia de terapia génica basada en la administración IV del vector AAV9-Galns. Dicha administración permitió el incremento de actividad GALNS en suero y en múltiples órganos. El tratamiento permitió una recuperación del tamaño corporal y mejoró la tasa de supervivencia. También se detectó una mejora en el cartílago de crecimiento, con una normalización de los niveles de KS, que se tradujo en una normalización de la composición y estructura ósea. El tratamiento con AAV9-Galns llevó a una mejoría de las alteraciones en las articulaciones de las ratas MPS IVA, que resultaron en una normalización de la fuerza de agarre. El tratamiento también fue capaz de recuperar el esmalte y mejorar el fenotipo dentario de las ratas MPS IVA. A nivel periférico, se normalizaron las células vacuoladas del hígado, el sistema respiratorio y el corazón. En cuanto al SNC, se observó una normalización de los niveles de KS y de las alteraciones observadas en ratas MPS IVA no tratadas.
En conjunto, estos resultados mostraron que el nuevo modelo de rata MPS IVA era capaz de desarrollar los principales signos clínicos de la enfermedad de Morquio A y que una sola administración IV del vector AAV9-Galns era capaz de mejorar e incluso corregir las alteraciones observadas en dicho modelo. Por ello, la estrategia de terapia génica descrita en este trabajo podría constituir la base preclínica para la translación hacia la clínica de la administración de AAV9-Galns en pacientes de Morquio A.
