Efecto de las citoquinas sobre la celula beta humana y una linea celular pancreatica insular humana generada mediante transfeccion con adn de sv-40"

• Autores: María Gloria Soldevila Melgarejo
• Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 1991
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Màrius Foz Sala (presid.), Ramón Gomis (secret.), Jorge Prats Viñas (voc.), Ramon Vilella Puig (voc.), Josep Egozcue (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Inmunología
  • Ciencias médicas
    • Ciencias clínicas
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• Resumen

  • Hemos investigado los efectos de las citoquinas ifn-gamma y tnf-alfa sobre las celulas beta pancreaticas in vitro analizando la induccion de la expresion de moleculas de hla de clase ii, dr, dp y dq, y su efecto directo sobre la viabilidad y funcion de las celulas insulares para reproducir los fenomenos inmunopatologicos detectados in vivo en el pancreas diabetico: expresion aberrante de clase ii en las celulas beta y destruccion selectiva de estas, dada la descripcion del efecto citotoxico de citoquinas como il-1 en sistemas animales in vitro. 1000 u/ml de ifn - tnf durante tres dias indujo la expresion de dr, dp y dq en las celulas beta y alfa insulares siguiendo la jerarquia dr dq dp. Mediante cuatro metodos diferentes: inspeccion al microscopio, recuento celular, secrecion hormonal y liberacion especifica de cromio demostramos que ifn-tnf son citotoxicos para las celulas beta pero el efecto no es especifico (afecta a las celulas alfa). Estos resultados indican que las celulas beta potencialmente podrian presentar antigenos a cualquier tipo de linfocito t, y que las citoquinas podrian jugar un papel en la destruccion de las celulas beta en la diabetes tipo i. La escasez de suministro de tejido pancreatico humano ha sido hasta la actualidad el mayor factor limitante en la investigacion de la diabetes tipo i, por ello hemos llevado a cabo un proyecto de inmortalizacion de celulas beta pancreaticas humanas. Mediante transfeccion con el plasmido px-8 que contiene adn de sv-40 hemos generado una linea celular insular que produjo insulina solo durante los primeros pasajes pero que ha mantenido el linaje epitelial y neuroendocrino de las celulas insulares progenitoras. Asimismo las celulas inmortalizadas hiperexpresan moleculas de hla de clase i y son inducidas a expresar clase ii con citoquinas (ifn), lo que las convierte en un buen sustrato para la realizacion de experimentos de presentacion de antigenos a linfocitos t obtenidos