Study of the biochemical and structural properties of thrombin-activatable fibrinolysis inhibitor and the metallocarboxypeptidase inhibitor from the ascaris parasite
- Autores: Laura Sanglas Crespi
- Directores de la Tesis: Francesc Xavier Avilés Puigvert (dir. tes.), Joan López Arolas (codir. tes.)
- Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 2010
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Christian Sommerhoff (presid.), Josep Vendrell Roca (secret.), Pablo Fuentes Prior (voc.)
- Materias:
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- Resumen
La presente tesis doctoral está centrada en el estudio de las enzimas proteolíticas llamadas metallocarboxipeptidasas, junto con sus inhibidores proteicos. Concretamente, la primera parte de la tesis está basada en la caracterización bioquímica y estructural de una metallocarboxipeptidasa localizada en plasma, llamada B2 o TAFI (inhibidor de la fibrinolisis activado por trombina). La segunda parte, se basa en la identificación bioquímica y estructural de el inhibidor proteico de metalocarboxipeptidases identificado en el parasito Ascaris.
En la primera parte de la tesis, se especifica las relaciones existentes entre la estructura y la función de TAFI. TAFI es un enzima que regula el equilibrio entre la coagulación y la fibrinólisis de la sangre, siendo, con ello, una proteína de altísimo interés biomédico y farmacológico. TAFI es activada durante las cascadas de coagulación y fibrinolisis para inhibir la activación del plasminógeno a plasmina, y consecuentemente, retrasa la disolución del coágulo. En esta tesis se presenta la estructura tridimensional de la proteína y se relaciona la estructura con la inestabilidad estructural que presenta la proteína en el sistema sanguíneo. Además, en este estudio, se demuestra la capacidad inhibidora de distintos inhibidores proteicos, que puede ser de elevado interés para un posterior diseño racional de inhibidores.
En la segunda parte de la tesis, se presenta la identificación y posterior caracterización de un nuevo inhibidor de metallocarboxipeptidases. Este inhibidor, aislado del parasito intestinal Ascaris suum, ha sido estudiado en profundidad a nivel bioquímico. Además, se ha aislado la proteína de la fuente natural, se ha clonado el cDNA, expresado de forma recombinante, se ha determinado la actividad inhibidora, su estructura y mecanismo de plegamiento. Además, se han realizado estudios con los parásito para conocer la posible función biológica de este nuevo inhibidor. Este parásito afecta a humanos, con más de un billón de personas afectadas alrededor del mundo, implicando en ocasiones, importantes problemas sanitarios. Además, es un parásito que afecta al los cerdos, generando problemas económicos en el sector porcino.
Los resultados obtenidos de este inhibidor sugieren que es una molécula importante para la supervivencia del parasito en el huésped.
Éstos estudios han estado presentados en la tesis en formato artículo, concretamente en un compendio de 4 artículos:
(1) Sanglas L, Valnickova Z, Arolas JL, Pallarés I, Guevara T, Solà M, Kristensen T, Enghild JJ, Aviles FX, Gomis-Rüth FX.
Structure of activated thrombin-activatable fibrinolysis inhibitor, a molecular link between coagulation and fibrinolysis.
(2) Sanglas L, Arolas JL, Valnickova Z, Aviles FX, Enghild JJ, Gomis-Rüth FX. Insights into the molecular inactivation mechanism of human activated thrombin-activatable fibrinolysis inhibitor, TAFIa.
J Thromb Haemost. 2010 Jan 14; 8:1056-1065.
(3) Sanglas L, Aviles FX, Huber R, Gomis-Rüth FX, Arolas JL.
Mammalian metallopeptidase inhibition at the defense barrier of Ascaris parasite PNAS. 2009 Feb 10;106 (6): 1743-7 (4) Insights into the two-domain architecture of the metallocarboxypeptidase inhibitor from the Ascaris parasite inferred from the mechanism of its oxidative holding.
Biochemistry. 2009 Sep 1;48(34):8225-32.
Arolas JL, Sanglas L, Lorenzo J, Bronsoms S, Aviles FX.
