Resumen de Caracterització funcional de la interacció i fosforilació de la subunitat beta del factor d'inici de la síntesi proteica elf2 per la proteïna quinasa ck2
Francesc Joseph Llorens Torres
El presente trabajo se incluye dentro de un amplio proyecto iniciado en el grupo del Dr. Itarte que trata de estudiar algunos de los procesos celulares en los que la proteína quinasa CK2 ejerce sus funciones.
El proyecto se inició con la observación que en diferentes passos cromatográficos, durante la purificación de CK2 de hígado de rata, CK2 co-purificada con proteínas la separación de las cuales era muy díficil, identificadas posteriormente como la chaperona grp94 (endoplasmina) y el factor de inicio de la síntesis proteica elF2. Esta última interaccionaba con CK2 a través de las subunitats beta i gamma, y en ensayos de actividad CK2 en presencia de elF2beta, se producía un aumento de la Km de CK2 sobre beta-caseína.
Estos trabajos así como datos aportados en la bibliografía donde se describía elF2beta como substrato in vitro de CK2 llevó la elaboración de la presente tesis, en la cual se ha caracterizado y se han explicado funcionalmente las interrelaciones existentes entre CK2 i elF2beta, tanto a nivel de interacción entre ambas proteínas, como a nivel de fosforilación de elF2beta, intentando profundizar en el papel que esta fosforilaciónpuede tener en la funcionalidad del proceso de síntesis proteica donde elF2 tiene un papel clave en su mecanismo de regulación.
Los resultados indican que elF2beta interacciona in vitro e in vivo como CK2, tanto con sus subunidades aisladas como con la forma holoenzimática de la quinasa. Esta interacción se procure mediante el dominio C-terminal de elF2beta y el cluster de residuos básicos y el segmento de activación deCK2.
La interacción elF2beta-CK2 repercute en la actividad CK2, produciéndose una inhibición de la actividad quinasa sobre otros substratos de CK2 como beta-caseína o calmodulina.
A su vez CK2 fosforila in vitro e in vivo enlF2beta en las serinas 2 y 67. La mutación de estos centros provoca una inhibición parcial de la síntesis proteica en
