Anexina a6 regula el transporte intracelular del colesterol a través de rab7 y tbc1d15
- Autores: Ana Garcia Melero
- Directores de la Tesis: Carles Rentero (dir. tes.)
- Lectura: En la Universitat de Barcelona ( España ) en 2016
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Gustavo Egea López (presid.), Anna Aragay Combas (secret.), José Carlos Fernández-Checa Torres (voc.)
- Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Biomedicina por la Universidad de Barcelona
- Materias:
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- Resumen
En la regulación de las vías de transporte intracelular participan una gran variedad de proteínas entre las que destacan Rabs, SNAREs y Anexinas. Su capacidad intrínseca para unirse a las membranas celulares, así como su localización específica y su función, promueven la especialización de las diferentes vías de transporte intracelular. El tráfico intracelular es un mecanismo esencial en la correcta distribución celular de colesterol. Existen múltiples proteínas implicadas en este tráfico intracelular, de hecho, se han asociado mutaciones específicas con diversas enfermedades neurodegenerativas, como la enfermedad de Niemann-Pick tipo C, producida por mutaciones en el gen que codifican para la proteína NPC1. NPC1 es una de las principales proteínas involucradas en los mecanismos de exportación de colesterol de los endosomas tardíos (LE). Sin embargo, los LE están dotados de varios dispositivos moleculares para garantizar la salida y la clasificación de colesterol, como por ejemplo: las proteínas relacionadas con la unión a oxysterol-(ORP) (OSBP), las proteínas Rab (Rab7, Rab8 o Rab9), MLN64, Lamp2A, o los transportadores ABCA1, entre otros.
Anexina A6 (AnxA6) es una proteína de unión a fosfolípidos de forma dependiente de calcio. Está implicada en múltiples procesos celulares como la homeostasis de colesterol y el tráfico intracelular. Trabajos previos del grupo ha demostrado que la sobreexpresión de AnxA6 induce acumulación colesterol en los LE. Los principales objetivos de esta tesis han sido determinar las consecuencias fisiológicas de la acumulación de colesterol en células que sobreexpresan AnxA6, así como analizar el mecanismo por el cual AnxA6 bloquea la salida de colesterol de los LE.
Durante el desarrollo de esta tesis se ha estudiado la participación de la AnxA6 en la localización y función de la proteína t-SNARE, Syntaxina-6 (Stx6) y su implicación en el transporte intracelular de colesterol. Se ha observado una alteración de la localización subcelular de Stx6 en células que sobreexpresan AnxA6. Dicho cambio de localización inhibe el reciclaje de integrina αVβ3 y α5β1 a la membrana plasmática, afectando a la migración celular en estos modelos.
Asimismo, en esta tesis se ha demostrado una nueva interacción de AnxA6 con una proteína activadora de la actividad GTPasa de Rab7, TBC1D15. Dicha interacción promueve el direccionamiento de TBC1D15 a la superficie de los LE, donde inactiva a Rab7. La regulación de la actividad de Rab7, a través de AnxA6, afecta a la salida de colesterol de los LE. La sobreexpresión de AnxA6, en células mutantes NPC, inhibe la salida colesterol de los LE, mientras que el silenciamiento de AnxA6 elimina el colesterol de los LE y aumenta la formación de cuerpos lipídicos (LD), posiblemente debido a la formación de contactos entre las membranas de los LE y el ER. Por lo tanto, este estudio demuestra que el complejo proteico AnxA6/TBC1D15, forma parte de la maquinaria molecular responsable de modular el transporte de la salida de colesterol de los LE. Es importante destacar que, por primera vez se muestra que el silenciamiento de AnxA6 puede reducir el colesterol acumulado en los LE de células mutantes NPC1 y por lo tanto podrían proporcionar una nueva alternativa para restaurar la distribución intracelular de colesterol, en este modelo.
