Estudio de aspectos básicos relacionados con la formación de los intercambios entre cromátidas hermanas

• Autores: Paula Daza Navarro
• Directores de la Tesis: Pablo Escalza Ruiz (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Sevilla ( España ) en 1992
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Felipe Cortés Benavides (presid.), Jesús Cano Pérez (secret.), Ricardo Marcos Dauder (voc.), Antonio Marín Rodríguez (voc.), Joaquín Piñero Bustamante (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología celular
      • Cultivo celular
      • Citogenética
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• Resumen

  • En el presente trabajo hemos estudiado tres aspectos concretos relacionados con el fenómeno de formación de los intercambios entre cromátidas hermanas (sces) en células de mamíferos, con el animo de aportar nuevos datos que contribuyan a dilucidar el aun hoy desconocido significado biológico de los mismos. Estos han sido, estudiar la verdadera frecuencia con que se producen espontáneamente, la persistencia en el material genético de las lesiones que inducen su formación y el controvertido problema de la cancelación de los sces. Clásicamente los estudios sobre este fenómeno se han llevado a cabo en células que han incorporado en su material genético la bromodesoxiuridina (brdu), análogo halogenado de desoxitimidina (dt), durante dos rondas de replicación, resultando las cromátidas de los cromosomas metafísicos teñidas diferencialmente en dos tonos. Los intercambios observados en esa segunda mitosis (m2) corresponden a la suma de los sces ocurridos durante ambos ciclos celulares, siendo imposible distinguir los que ocurrieron en la primera generación celular de los que se formaron en la segunda. Para abordar el estudio de los tres aspectos citados anteriormente, se hace imprescindible conocer con exactitud en que ciclo celular se produjo cada sce observado. Por ello comenzamos por estandarizar y poner a punto una técnica de tinción diferencial en tres tonos de los cromosomas metafásicos, en lugar de solo dos, la cual permite asignar con exactitud cada intercambio a la generación celular en la cual tuvo lugar (técnica twd). Un problema siempre presente a la hora de conocer los verdaderos sces espontáneos es que el propio nucleosido halogenado, imprescindible para la visualización de los mismos, también induce intercambios. Sin embargo, nuestra técnica twd modificada nos permitió estudiar en células cho la influencia de bajas dosis de brdu sobre la ocurrencia de sces exclusivamente durante el primer ciclo celular (sce1),