Resumen de Virus de la diarrea epidémica porcina: patogénesis y protección
El virus de la diarrea epidémica porcina (PEDV) es un coronavirus entérico que causa una alta tasa de morbilidad y de mortalidad, que puede llegar al 100% en lechones de menos de una semana de edad. Las cepas epidémicas virulentas que circulan actualmente causan graves pérdidas económicas a nivel mundial. Aunque se han utilizado extensivamente vacunas inactivadas y vacunas vivas atenuadas, la aparición de las cepas epidémicas altamente virulentas y los brotes recurrentes, que ocurren incluso en granjas con animales vacunados, resaltan la necesidad de nuevas vacunas eficaces y seguras. Las vacunas vivas atenuadas son las más eficaces para proteger frente al PEDV porque inducen una respuesta inmune duradera en mucosas. El desarrollo de vacunas que contengan modificaciones definidas en el genoma, mediante ingeniería genética, es una aproximación prometedora para el desarrollo de nuevas vacunas. En ese sentido, en esta tesis doctoral se han diseñado virus recombinantes que podrían ser candidatos a vacuna frente a PEDV. En primer lugar, un virus atenuado basado en el genoma del virus de la gastroenteritis porcina transmisible (TGEV), que expresa una proteína de la espícula quimérica con la de una cepa virulenta de PEDV (rTGEV-RS-SPEDV). Este virus estaba atenuado en lechones de 5 días, dado que los animales infectados no perdieron peso, ninguno de ellos murió y el no virus causó daño en el intestino de los animales infectados. Es más, el virus rTGEV-RS-SPEDV protegió frente al desafío con una cepa virulenta de PEDV, reduciendo los títulos de virus del desafío en el yeyuno y con niveles de RNA del virus de desafío indetectables en las heces. Además, indujo una respuesta inmune humoral específica para PEDV, incluidos los anticuerpos neutralizantes. Por otro lado, se ha generado un cDNA infectivo para PEDV que daba lugar a un virus recombinante virulento. Utilizando este cDNA infectivo, se ha generado una colección de virus sintéticos con cambios en el sesgo en el uso de los pares de codones (CPB) del gen de la nucelocápsida. Estos virus recombinantes presentaron un amplio rango de virulencia, lo que los convierte en herramientas muy valiosas para el estudio de las bases moleculares de la patogénesis del PEDV. Uno de ellos, rPEDV-N2, creció eficientemente en el intestino de los animales infectados y estaba atenuado dado que el 100% de los animales sobrevivieron a la infección. Por tanto, se seleccionó como la base para un candidato a vacuna, que incluiría estrategias de atenuación adicionales, alguna de las cuales se contempla en esta tesis.
