OBJETIVOS Establecer el origen i proceso de maduración del tejido linfoide asociado al intestino delgado durante las primeras etapas de vida y determinar marcadores de maduración de este sistema de defensa, tanto a nivel proximal como distal de éste. En primer lugar, se ha determinado el desarrollo fenotípico de los linfocitos intraepiteliales (IEL) y de la lámina propia (LPL) de la mucosa intestinal, así como la capacidad secretora de inmunoglobulinas, en ratas neonatas desde el día de nacimiento y durante todo el periodo de lactancia. También se ha profundizado en el origen y maduración de una población típica muscosal, los IEL CD8alfalalfa TCRalfabeta en relación a los procesos de selección tímica y presentación antigénica en el modelo de ratón transgénico TCR H-Y.
METODOLOGÍA Se han obtenido las poblaciones celulares de los diferentes compartimentos linfoides (IEL, LPL, esplenocitos y timocitos) mediante procesos de extracción mecánica, digestión química y enzimática y posterior purificación. Se han utilizado técnicas de marcaje doble y múltiple, citometría de flujo y ELISPOT.
En el caso de los animales transgénicos también se han utilizado técnicas de PCR y RT-PCR, así como la creación de un nuevo modelo doble transgénico.
RESULTADOS Y CONCLUSIONES Los IEL y LPL de intestino delgado maduran durante el periodo de lactancia e ingesta de la primera dieta sólida, aunque algunas subpoblaciones no alcanzan ni la proporción de adulto (IEL CD4+CD8+, LPL CD4+) ni el fenotipo maduro (LPL CD25+). Durante la primera mitad del periodo de lactancia, tanto a nivel del epitelio como en la lámina propia intestinales, los linfocitos CD8+ y las células Natural Killer con fenotipo CD8+ constituyen la población mayoritaria, probablemente representando el principal sistema defensivo en esta etapa. Durante la lactancia, la capacidad intrínseca de defensa humoral en el intestino está poco desarrollada, sec
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