Descripción de método de cultivo de células glóticas humanas
- Autores: Mireya Bonet
- Directores de la Tesis: Enrique Zapater Latorre (dir. tes.), Jorge Basterra Alegría (dir. tes.)
- Lectura: En la Universitat de València ( España ) en 2011
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: José Vicente Bagán Sebastián (presid.), José Dalmau Galofré (secret.), Carlos Sprekelsen Gassó (voc.), Jose Miguel Osete Albaladejo (voc.), Diego Gómez Angel (voc.)
- Materias:
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- Resumen
INTRODUCCIÓN El cultivo celular es un método que sirve para el estudio del comportamiento de las células animales sin estar sometidas a las variaciones sistémicas ocurridas dentro del organismo durante su normal homeostasis.
HIPÓTESIS Y OBJETIVOS El objeto de este trabajo de Tesis Doctoral es describir un método de cultivo de células glóticas humanas.
MATERIAL Y MÉTODO Se han realizado cultivos celulares de células glóticas humanas a partir de biopsias de cuerda vocal obtenidas durante la práctica de microcirugías laríngeas y a partir de fragmentos de cuerda vocal macroscópicamente indemne procedentes de especimenes de laringuectomías.
Dado que los factores que contribuyen a la aparición de un carcinoma laríngeo actúan sobre todo el órgano, en áreas adyacentes al tumor puede existir cierto grado de displasia epitelial. Esto tiene importancia en el caso de las muestras remitidas para cultivo obtenidas a partir de fragmentos de cuerda vocal de especímenes de laringuectomías. En este trabajo también pretendemos estudiar hasta qué punto puede desarrollarse algún grado de displasia en las cuerdas vocales de aspecto macroscópico normal en las laringes con carcinoma. Por este motivo, hemos realizado también un estudio retrospectivo de la presencia y grado de displasia en las regiones adyacentes a tumor en pacientes intervenidos de tumores malignos de localización faringolaríngea o laríngea que requirieron la práctica de laringuectomías parciales supracricoideas y de laringuectomías totales.
Por último, hemos realizado un estudio estadístico para conocer cuáles son las variables de nuestra serie que se relacionan con el crecimiento celular en cultivo.
RESULTADOS El trabajo realizado nos permitió aislar células glóticas y caracterizarlas con inmunocitoquimia mediante anticuerpo monoclonal Mouse Anti- Human citokeratin 19 (DAKO ®).
DISCUSIÓN Disponer de un modelo de cultivo de células glóticas puede ser de gran ayuda para analizar el mecanismo de actuación de diversos agentes en la génesis de las displasias celulares y de los carcinomas laríngeos.
CONCLUSIONES El modelo experimental de cultivo en monocapa que describimos, es el primero que permite cultivar de forma exclusiva células glóticas humanas. En este método de cultivo se requiere menor cantidad de colágeno de la que se considera necesaria en otros modelos descritos con anterioridad. Los resultados de nuestro trabajo muestran cómo los especímenes obtenidos en las cuerdas vocales no neoplásicas en pacientes a los que se les había practicado una laringuectomía total o parcial supracricoidea, tienen mayores posibilidades de crecimiento en cultivo celular. El estudio anatomopatológico realizado en los especimenes procedentes de piezas quirúrgicas que no se utilizaron para cultivo, revela distintos grados de displasia en áreas adyacentes al tumor.
