Resumen de Papel funcional de los receptores eph en el càncer colorrectal
Estudios recientes apuntan a la ruta de señalización de los receptores tirosin quinasa EPH como una vía de gran importancia en el proceso tumorogénico colorrectal. Nuestro objetivo es evaluar la presencia de mutaciones en el gen EPHB2 en tumores gástricos y de endometrio y la posible función de EPHB4 como gen supresor de tumores y su potencial como marcador de pronóstico en pacientes con cáncer colorrectal. Se encontraron mutaciones de corrimiento de pauta de lectura de EPHB2 en el 39% (24/64) de los tumores gástricos y en el 14% (8/56) de los tumores de endometrio.Para ello realizamos una búsqueda de mutaciones en una repetición A9 en el exón 17 de EPHB2 en tumores gástricos y de endometrio con inestabilidad de microsatélites. También se realizaron estudios de clonogenia in vitro, un modelo de xenografts y estudios con un modelo murino en el que se ha inactivado EphB4. Asimismo, se evaluó la presencia de hipermetilación del promotor de EPHB4 en 112 tumores colorrectales humanos y se midieron los niveles de expresión de EPHB4 en 256 tumores colorrectales humanos mediante MSP (methylation-specific PCR) e inmunohistoquímica, respectivamente. Se observó que la reintroducción de EPHB4 en líneas deficientes causa una reducción en la capacidad proliferativa de las células, tanto en ensayos clonogénicos como en xenografts. Igualmente la inhibición de EPHB4 mediante un dominante negativo en líneas con alta expresión, causa un aumento en la capacidad clonogénica in vitro e in vivo. Además, la pérdida de un alelo de EphB4 en un modelo de tumorogénesis gastrointestinal (Apcmin) resulta en una reducción del 25% en la supervivencia comparado con animales EphB4+/+ (p<0,0001). Los ratones EphB4+/- en el intestino delgado tienen tumores significativamente mayores respecto de los ratones control (1,6 mm versus 1 mm; p=0,0002) así como una mayor cantidad de tumores en ciego y colon (2,4 versus 0,25 tumores por animal; p=3,07x10-5). No se observaron cambios en el programa de diferenciación de los diferentes linajes epiteliales ni en el número de células apoptóticas. Sin embargo, se observó un aumento significativo de la proliferación tanto en el epitelio intestinal normal como en los tumores de animales ApcMin/+;EphB4+/- comparado con ratones ApcMin/+;EphB4+/+. Estudios de microarrays de expresión en los tumores intestinales de estos animales indicaron un posible aumento de la capacidad invasora en tumores con bajos niveles de EphB4 que fue confirmado experimentalmente usando un sistema isogénico in vitro. Además, en una serie de 256 pacientes con cáncer colorrectal, bajos niveles de expresión tumoral de EPHB4 estaban asociados con una supervivencia significativamente más corta (supervivencia media de 1,8 versus >9 años; p=0,01) y la pérdida de expresión estaba asociada a la hipermetilación del promotor de EPHB4. Así pues, EPHB2 tiene un papel relevante en la progresión de los tumores gástricos pero no en los de endometrio y EPHB4 es un nuevo gen supresor de tumores en cáncer colorrectal con alto valor pronóstico.
