Epidemiología y diagnóstico de la amphimeriosis en Ecuador
- Autores: William Fernando Cevallos Trujillo
- Directores de la Tesis: Manuel Calvopiña Hinojosa (dir. tes.), Pedro Fernández Soto (codir. tes.), Antonio Muro Álvarez (codir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Salamanca ( España ) en 2018
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Basilio Valladares Hernández (presid.), José Manuel Correia da Costa (secret.), Antonio Marcilla Díaz (voc.)
- Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Salud y Desarrollo en los Trópicos por la Universidad de Salamanca
- Materias:
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- Resumen
La amphimeriosis es una nueva enfermedad soonótica emergente que afecta a los humano y es causada por el parásito trematodo de vías biliares Amphimerus sp. perteneciente a la familia Opisthorchiidae, transmitido por la ingesta de peces de río crudos o poco cocinados.
En el año 2011, reportamos altas tasas de prevalencia de infección en la población indígena Chachi que habita en áreas tropicales húmedas, rurales y remotas de la región noroccidente del Ecuador. Además,se evidenciaron altas tasas de infección en animales domésticos (perros y gatos) residentes en éstas comunidades. Se conoce muy poco sobre la sintomatología causada y el tratamiento de esta enfermedad. La detección microscópica de los huevos en heces, es el método actual para diagnosticar la infección en humanos y animales. Sin embargo, este método tiene baja sensibilidad y la morfología de los huevos puede confundir con otros trematodos hepáticos e intestinales presentes en las heces.
Para mejorar la sensibilidad y especificidad del diagnóstico de desarrollaron y validaron un ensayo inmunoenzimático (ELISA) para detectar anticuerpos circulantes IgG anti-Amphimerus sp. y la técnica molecular tipo LAMP (Loop mediated isothermal amplification).
Para el estudio del ELISA se utilizaron antígenos solubles totales del parásito adulto Amphimerus sp. Se aplicó la técnica en 219 sueros de personas infectadas y saludables. La sensibilidad y especificidad de la prueba fue de 85,0% y 71,0% respectivamente. Se encontró reactividad cruzada con Paragonimus mexicanus, Fasciola hepatica, Schistosoma spp, Taenia solium, Strongyloides stercoralis, Mansonella spp. y Vampirolepis nana.
Para el estudio tipo LAMP, se amplificaron los 4 cebadores a partir de una secuencia de 459 pb del gen ITS2 de Amphimerus spp. se desarrolló una PCR convencional y un LAMP (LAMPhimerus). Se evaluaron las sensibilidades y especificidades tanto de la PCR como de LAMPhimerus. El límite de detección de ambas pruebas fue de 1 pg de ADN genómico. No hubo reacciones cruzadas con ADN de 19 parásitos utilizados, incluidos C. sinensis y O. viverrini. La evaluación en campo se realizó con 44 muestras de heces conservadas en alcohol al 80% la sensibilidad y especificidad para LAMPhimerus fue de 76,7% y 80,7%, respectivamente. Además se aplicó la técnica LAMPhimerus en 102 muestras de heces conservadas en papel de filtro común. Se obtuvo una sensibilidad de y una especificidad de 79.17% y una especificidad de 65.98%.
Las pruebas ELISA y LAMPhimerus, resultaron eficientes para uso en condiciones de campo y podrían ser aplicadas en el diagnóstico clínico de esta nueva enfermedad infecciosa tropical desatendida emergente, en seguimientos post-tratamiento y en programas de control y vigilancia de la enfermedad humana y de los reservorios domésticos y silvestres.
