Identificacion y caracterizacion genetica y enzimatica de una nueva ribonucleotidil reductasa bacteriana

• Autores: Albert Jordan Valles
• Directores de la Tesis: Isidre Gibert (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 1996
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Joan Josep Guinovart i Cirera (presid.), Montserrat Llagostera Casas (secret.), Enrique Herrero Perpiñan (voc.), M. Antonia Velázquez Henar (voc.), Josep Casadesús Pursals (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Microbiología
      • Bacteriología
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• Resumen

  • En este trabajo han sido aislados los genes nrdab de salmonella typhimurium (st), que codifican su enzima ribonucleotidil reductasa (rr) aerobica, y tambien los operones nrdef de esta especie y de escherichia coli (ec), que codifican una nueva rr de la clase i. Mientras los genes nrdab de st presentan un grado de conservacion muy alto con respecto a los mismos de ec, los productos de los genes nrdef (r1e y r2f) presentan unas secuencias de aminoacidos poco conservadas con el resto de rr de la clase i, aunque los residuos esenciales para su actividad tambien estan presentes. La caracterizacion de las proteinas r1e y r2f purificadas han demostrado que esta enzima conserva las propiedades bioquimicas de la clase a la cual pertenece: presencia de un radical tirosil y de un centro diferirico, asi como una estructura tetramerica. A su vez presenta unas caracteristicas muy particulares como son la ausencia de regulacion alosterica negativa de su actividad y la utilizacion de un sistema diferente a las proteinas tioredoxina y glutaredoxina para recibir el poder reductor del nadph. Esto ha justificado la creacion de la subclase ib para diferenciar las enzimas codificadas por los genes nrdef de las codificadas por los genes nrdab (subclase ia). A pesar de existir los genes nrdef en los cromosomas de ec y st, los genes nrdab son esenciales para el crecimiento aerobico, y la existencia de mutaciones en estos genes no puede ser suplida por los genes nrdef cromosomicos. Hemos demostrado que la duplicacion de la dosis genica del operon nrdef en el cromosoma permite la complementacion de mutantes nrdats, indicando que en su locus los genes nrdef estan sometidos a un control muy estricto de su expresion. La funcion de la rr nrdef no es servir de recambio de los genes nrdab, ni responde la forma general a la inhibicion de la sintesis del dna. En la bacteria lactococcus lactis una enzima perteneciente a esta subclase es activa. El estudio de