La presente tesis doctoral tiene por objetivo la extension de la innovadora tecnica de inmovilizacion de material biologico, que representan los biocomposites rigidos, hacia una amplia gama de enzimas de interes en el desarrollo de biosensores amperometricos. Se pretende conocer si este tipo de biomateriales representan una tecnica general de inmovilizacion de enzimas (y de los correspondientes cofactores, mediadores, catalizadores) o si, por el contrario, solamente son compatibles con unos sistemas enzimaticos determinados. Para llegar a cumplir este objetivo, se ha dividido el trabajo experimental en tres direcciones diferentes, pero integradas y complementarias entre si: 1.- construccion, caracterizacion y evaluacion de biosensores basados en composites de grafito-epoxy y grafito-metacrilato modificados con sistemas monoenzimaticos. En este primer estudio se inmovilizan dos clases de enzimas. 1a) las enzimas oxidasas (peroxidasa de rabano y alcohol oxidasa). En este estudio se incorporara en el biocomposite el mediador quimico redox, hierro (iii) ftalocianina, cuando se emplea la enzima alcohol oxidasa. Paralelamente se construiran biosensores en ausencia del mediador quimico. En el caso de la enzima peroxidasa el estudio contempla la presencia y ausencia de platino en el biocomposite. En ambos estudios la incorporacion del mediador quimico y el platino tienen como fin disminuir el potencial al cual se llevaran a cabo las medidas amperometricas. 1b) las enzimas deshidrogenasas (glucosa deshidrogenasa y alcohol deshidrogenasa). Para este tipo de biosensores inmovilizara conjuntamente en el biocomposite el cofactor enzimatico beta-nicotinamida adenin dinucleotido (nad) como las enzimas. 2.- construccion, caracterizacion y evaluacion de biosensores basados en los anteriores composites rigidos conductores modificados con sistemas bienzimaticos. En este punto se construiran dos tipos de biosensores, en los cuales el ma
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