Francisco Javier Rebordosa Trigueros
La presente tesis se centra en el desarrollo de una vacuna marcadora contra el bhv-1 basada en una cepa viral que no expresa la glicoproteina e(ge). Para localizar e identificar el gen de la ge en el genoma del virus, se ha secuenciado un fragmento de la us del bhv-1 en el que se ha hallado un orf que codifica para un polipeptido de 575 aas (61,2 kda), cuya secuencia aminoacidica presenta una gran similud con la ge del hsv-1 y de otros alphaherpesvirus, indicando que este orf corresponde al gen de la ge del bhv-1. Utilizando tecnicas de recombinacion homologa in vivo, se ha obtenido una cepa del bhv-1 que presenta una delecion en el marco de lectura de la ge (bhv-ige-) y como consecuencia no expresa esta glicoproteina. La virulencia del bhv-1ge- ha sido valorada tanto in vivo como in vitro. Los datos obtenidos in vivo muestran que la cepa ge-, a pesar de presentar una virulencia muy reducida, proteje a las terneras de la confrontacion con el virus salvaje. Asi mismo, la infeccion experimental con el bhv-1ge- no induce la aparicion de anticuerpos contra la ge, permitiendo la diferenciacion serologica entre animales infectados y animales vacunados. Los resultados obtenidos in vitro indican que la ge es una glicoproteina imprescindible para que el virus pueda transmitirse directamente de celula a celula. La carencia de este mecanismo de infeccion podria explicar la menor capacidad del bhv-1ge- para propagarse en los tejidos, asi como su mayor sensibilidad a la accion del sistema inmunitario del animal infectado.
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