Resumen de Estudios estructurales y funcionales del proceso de activacion de la procarboxipeptidasa a2 humana. Aislamiento y clonacion de un nuevo inhibidor
El tema principal de esta tesis es el estudio de diferentes mecanismos de regulación de la actividad carboxipeptidasa. El primer objetivo fue la expresión de la PCPA2 humana en Pichia pastoris hasta niveles de 250 mg/l. El estudio de su proceso de activación nos muestra que el primer corte tríptico es suficiente para liberar el segmento de activación, y que durante el proceso se producen tres fragmentos de 96, 94 y 92 residuos. También se han calculado sus constantes catalíticas para diferentes sustratos. La resolución de su estructura tridimensional por difracción de rayos X aislado y con el inhibidor benzilsuccinico, ha permitido explicar diferentes características del proenzima a nivel estructural; como son su actividad intrínseca frente sustratos pequeños y su proceso de cativación. También se ha realizado el aislamiento y determinación de la estructura primaria de un nuevo inhibidor de carboxipeptidasa en la sanguijuela Hirudo medicinalis.
Este presenta un mecanismo de inhibicion similar la inhibidor encontrado en patata, donde la cola C-terminal penetra hasta el centro activo.
