Estudio en dianthus sp. De la capacidad organogenica y de la aptitud de transformacion via agrobacterium tumefaciens
- Autores: Montserrat Estopà Bagot
- Directores de la Tesis: Joaquima Messeguer Peypoch (dir. tes.)
- Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 1999
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Pere Arús Gorina (presid.), Pilar Fontanet Ferrussola (secret.), Charlotte Poschenrieder (voc.), M. Dolores Vazquez Rodriguez (voc.), José Antonio Martínez Izquierdo (voc.)
- Materias:
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- Resumen
La objetivos generales de esta tesis son aumentar la tasa de regeneración y de transformación via Agrobacterium tumefaciens a partir de segmentos basales de hojas de clavel mediante el etudio de determinado factore que pueden tener algún tipo de influencia en la variabilidad de respuesta observada para estos dos caracteres.
Así, se determinó que la capacidad de regeneración estaba influenciada por el genotipo y que era un carácter heredable. Se determinó el número de genes que controlaban la respuesta de regeneración, así como los genotipos de determinadas variedades comerciales. Por otro lado, la capacidad de transformación podría estar fuertemente influenciada por aspectos relacionados con el estado fisiológico del material vegetal o por la propia técnica de transformación. A su vez, estos factores podrían ocultar una posible base genética modulando la respuesta de este carácter.
También se determinó que la respuesta de la capacidad de regeneración y la de transformación variaban según el estadio de desarrollo en que se encontrara la hoja que se introducía in vitro. Por esta razón, se desarrolló un modelo teórico, basado en el modelo logístico, que se ajustaba satisfactoriamente a la aparición sucesiva de las hojas de clavel en un sistema de crecimiento constante como es el cultivo estándar de clavel en invernadero. La hoja que presentaba la respuesta más elevada para los dos caracteres era la que crecía de manera exponencial.
De este estudio se obtuvieron 14 plantas transgénicas resistentes a la kanamicina y 7 resistentes a la fosfinotricina, procedentes de las variedades Scania y Gaudina. También se probó que ni la adición de triptona ni de tiosulfato de plata en el medio de cocultivo incrementaban la eficiencia de regeneración ni la de transformación valorada con la prueba histoquímica que reconoce la integración del gen gusA. La eficiencia de transformación sí que se veía incrementada
