Resumen de Analisis del metabolismo de celulas de cho recombinantes y desarrollo de estrategias de cultivo en medios definidos
Claudia Victoria Altamirano Gomez
En la presente memoria se estudia la mejora del crecimiento de las células HO TF 70R productoras de t-PA, mediante la optimización de medios de cultuvo definidos (libres de suero) y la definición de diferentes estrategias de cultivo sobre la base de consideraciones metabólicas.
El trabajose basa en tres ejes principales.En priemr lugar, la utilización y formulaicón de medios definidos, aspecto muy importante en el cultivo de células animales. En segundo lugar, el análisis del metabolismo de las células CHO encultivo in vitro, del que se desprende la desregulaciónmetabólica de estas células así como su flexibilidad. Fruto de este análisis se estudia la sustitución de los componentes pricipales del medio, glucosa y glutamina, por compuestos más lentamente metabolizables, que permitan un mejor balance en el metabolismo de las células,manteniendo su crecimiento y viavilidad.
En tercer lugar, el desarrollo de estrategias de cultivo que, teniendo en cuenta los resultados de los dos partados nateriores, permitan prolongar y mejorar los cultivos, y por tanto su rendimiento en producto. En este sentido se abordan estrategias de cultivo por lote alimentado (fed-batch) y en perfusión bifásica. El primer tipo de cultivo se basa en el diseño de medios de adición formulados en función de los requerimientos específicos de las células, previamente determinados. En el segundo caso, el conocimiento adquirido sobre el metabolismo de fuentes de carbono alternativas permite desarrollar procesos condos fases, que logran desacoplar por una parte el crecimiento celular (primera fase) y por otra el mentenimiento de la población celular enun estado citostático, viable y productivo, durante un periodo de tiempo muy sifinificativo (segunda fase).
