Caracterización del fenotipo y de la capacidad migratoria de los linfocitos en pacientes con leucemia mieloide crónica tratados con desatinib y efectos de este fármaco sobre el endotelio vascular

• Autores: Beatriz Colom Rodríguez
• Directores de la Tesis: Cecilia Muñoz Calleja (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2019
• Idioma: español
• Número de páginas: 112
• Tribunal Calificador de la Tesis: María José Calzada García (presid.), Elena Fernández Ruiz (secret.), Arántzazu Alfranca González (voc.), Luisa María Villar Guimerans (voc.), María Paloma Sánchez Mateos Rubio (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Biociencias Moleculares por la Universidad Autónoma de Madrid
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
  • Ciencias de la vida
    • Biología molecular
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  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen

  • Dasatinib es un inhibidor de BCR-ABL de segunda generación que se usa como fármaco de primera línea en la leucemia mieloide crónica, y a cuya gran eficacia contribuyen efectos terapéuticos poco caracterizados sobre una inmunidad deficitaria por la acción crónica de la neoplasia. Por ello, en este trabajo nos hemos propuesto caracterizar, mediante citometría de flujo multiparamétrica, los cambios inmunofenotípicos que se producían durante la enfermedad, durante el tratamiento con dasatinib, y durante la linfocitosis que habitualmente induce el fármaco y que se propone como uno de sus principales efectos inmunomoduladores. Nuestros resultados demuestran que los principales efectos de la enfermedad son la disminución de CD62L y CCR7, en correspondencia con la disminución de TN. Por otra parte, al diagnóstico, los linfocitos NK presentan un fenotipo más maduro que el de sujetos sanos.

    Dasatinib es capaz de revertir total o parcialmente los déficits que se detectan al diagnóstico y además tiene efectos per se sobre algunas subpoblaciones linfocitarias como el aumento de HLA-DR. La caracterización de la linfocitosis demostró que el aumento de linfocitos tras la toma del fármaco tiene lugar a expensas de un aumento de LT efectores y su correspondiente disminución de TN en SP, así como de un aumento de células NK más diferenciadas. Para intentar explicar la linfocitosis, nos planteamos que el fármaco estuviese afectando a la migración linfocitaria de los LT hacia órganos linfoides secundarios y observamos que los LT de nuestros pacientes migraban menos hacia CCL19 y 21 tras dos horas de la toma del fármaco; la causa era la disminución de la proporción de los LT CCR7+ en SP y no un efecto directo de dasatinib sobre la capacidad migratoria o la expresión de CCR7. En cuanto a la asociación de la respuesta terapéutica a dasatinib y los parámetros inmunológicos pudimos comprobar que el valor absoluto de los LT CD8+ al diagnóstico se asocia a una respuesta molecular temprana.

    Por otro lado, dasatinib produce efectos adversos graves como el derrame pleural y la hemorragia intestinal, que conllevan la interrupción del tratamiento y cuya patogénesis se desconoce. Por ello, y a través de distintos abordajes experimentales, comprobamos que dasatinib produce una importante desorganización del citoesqueleto de actina de células endoteliales HUVEC que se acompaña de una pérdida de las uniones homotípicas que abre espacios entre las células adyacentes. Este efecto tiene lugar de forma rápida, es dosis-dependiente y reversible. Su mecanismo molecular incluye la fosforilación de la cadena ligera de la miosina que probablemente se traduce en la activación de la NMII y en un aumento de la contractilidad celular. Experimentos de permeabilidad in vivo confirmaron que dasatinib produce una pérdida de la función de barrera del endotelio vascular.

    En resumen, los datos aportados en esta tesis contribuyen al conocimiento de los efectos de la LMC y del tratamiento crónico con dasatinib sobre el sistema inmunitario, lo que es de crucial importancia en uno de los cánceres hematológicos en el que el potencial curativo del SI es más evidente. Además, la identificación, al menos en parte, de las causas de los efectos adversos más graves de dasatinib puede mejorar notablemente el manejo terapéutico de estos pacientes.