Clonatge molecular i sequenciacio del cdna per la proteina 0. D'esperma de l'equinoderm holothuria tubulosa i aillament de clons genomics
- Autores: Eva Prats Miravitllas
- Lectura: En la Universitat de Barcelona ( España ) en 1990
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Mercè Durfort i Coll (presid.), Francesc Villarroya Gombau (secret.), Juan Antonio Subirana Torrent (voc.), Ferran Azorín Marín (voc.), Adolfo Ruíz-Carrillo Fité (voc.)
- Materias:
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- Resumen
LA PRETEINA 0., ESPECIFICA DEL ESPERMA DEL EQUINODERMO HOLOTHURIA TUBULOSA, ES UNA PROTEINA NUCLEAR BASICA DE CARACTERISTICAS QUE LA SITUAN ENTRE LAS HISTONAS Y LAS PROTAMINAS, TANTO EN COMPOSICION COMO EN SU POSIBLE FUNCION EN LA INTERACCION CON EL DNA, CONTRIBUYENDO CON LAS RESTANTES HISTONAS SOMATICAS A LA COMPACTACION DE LA CROMATINA ESPERMATICA. EL TRABAJO PRESENTADO EN LA MERMORIA DE TESIS HA CONSISTIDO EN LA SINTESIS DEL CDNA A PARTIR D ELA FRACCION DE RNA POLIA DE GONADA DE HOLOTHURIA TUBULOSA Y CONSTRUCCION DE LA BIBLIOTECA CORRESPONDIENTE EN EL VECTOR DE EXPRESION LAMBDA GT11. EL SONDEO CON ANTICUERPOS ESPECIFICOS CONTRA LA 0. HA PERMITIDO LA DETECCION DE CLONES POSITIVOS QUE HAN SIDO AISLADOS Y PURIFICADOS. UNO DE ESTOS CLONES HA SIDO SECUENCIADO, RESULTANDO EN UNA MOLECULA DE CDNA QUE COMPRENDE LA ZONA CODIFICANTE COMPLETA PARA LA PROTEINA, CORRESPONDIENTE A 77 AMINOACIDOS, Y SECUENCIAS FLANQUEANTES EN LOS EXTREMOS 5' Y 3'.
SE HA CALCULADO EL TAMÑO DEL RENA MENSAJERO QUE CODIFICA PARA LA PROTEINA, RESULTANDO DE UNOS 600 NUCLEOTIDOS. SE HA DETERMINADO QUE EL GEN DE LA 0. ESTA PRESENTE COMO COPIA UNICA EN EL GENOMA DE HOLOTHURIA.
EL CDNA CLONADO HA SIDO UTILIZADO COMO SONDA PARA DETECTAR Y AISLAR CLONES GENOMICOS QUE HIBRIDAN ESPECIFICAMENTE CON ELLA EN UNA GENOTECA DE HOLOTHURIA. A PARTIR DE LOS CLONES POSITIVOS PURIFICADOS SE HA REALIZADO EL MAPA DE RESTRICCION DEL FRAGMENTO DE DNA QUE CONTIENE SECUENCIAS CORRESPONDIENTES AL GEN DE LA 0..
