Estudis sobre la metilacio del dna en el model de l'espermatogenesi del gall. I-nivells de metilacio i d'activitat metilasa ii-metilacio i expressio dels gens d'ubiquitina

• Autores: Nativitat Rocamora Ibars
• Lectura: En la Universitat de Barcelona ( España ) en 1990
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Pere Suau León (presid.), Susana Balcells Comas (secret.), Pere Puigdomènech i Rosell (voc.), Ferran Azorín Marín (voc.), Albert Boronat (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
  • Ciencias de la vida
    • Genética
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• Resumen

  • LOS RESULTADOS DE HPLC DEMUESTRAN UNA IMPORTANTE HIPOMETILACION DEL DNA (30%), A LO LARGO DE LA ESPERMATOGENESIS DEL GALLO. HIPOMETILACION QUE SE PRODUCE, COMO MINIMO, A PARTIR DE LA MEIOSIS Y QUE SE DISTRIBUYE, DE FORMA CASI HOMOGENEA, A LAS DISTINTAS FRACCIONES CINETICAS DEL DNA. LA DIGESTION DEL DNA CON LA PAREJA DE ENZIMAS MSPI/HPAII, POR OTRO LADO, MUESTRA UNA DISTRIBUCION DE TAMAÑOS MUY SEMEJANTE ENTRE LOS DISTINTOS DNAS ANALIZADOS. EL ENSAYO DE LA ACTIVIDAD DNA-METILASA A PARTIR DE LOS DISTINTOS EXTRACTOS NUCLEARES, DEMUESTRA UNA BAJA DISPONIBILIDAD DEL ENZIMA ACTIVO EN EL TESTICULO MADURO, EN CORRELACION CON EL DESCENSO DE LOS NIVELES DE METILACION Y LA BAJA TASA DE PROLIFERACION DEL TEJIDO.

    FINALMENTE, TANTO LOS NIVELES ABSOLUTOS DE LOS METABOLITOS ADOMET Y ADOHCY, COMO LA RELACION ENTRE ELLOS, ADOMET/ADOHCY, NO JUSTIFICARIAN "PER SE" UNA INHIBICION DE LA ACTIVIDAD DNA-METILASA.

    SE DEMUESTRA LA PRESENCIA DE, COMO MINIMO, CUATRO GENES DE UBIQUITINA: DOS POLIUBIQUITINAS, UBI Y UBII, Y DOS GENES DE FUSION, UBCEP52 Y UBCEP80, EN EL POLLO. LA HIBRIDACION DEL RNA TOTAL CON SONDAS ESPECIFICAS DE LOS DISTINTOS GENES, DEMUESTRA UNA DISTRIBUCION DESIGUAL DE LA EXPRESION DE ESTOS A LO LARGO DE LA MADURACION DEL TESTICULO. EL TRANSCRITO DE UBIQUITINA MAYORITARIO EN TODOS LOS TEJIDOS ES EL CORRESPONDIENTE A LA EXPRESION DE LA UBI. LA EXPRESION DEL GEN UBII SE VE ESTIMULADA, ESPECIFICAMENTE, EN EL PROCESO DE MADURACION DEL TESTICULO. SE OBSERVA, TAMBIEN, LA PRESENCIA DE DOS TRANSCRITOS MINORITARIOS, CORRESPONDIENTES A LA EXPRESION DE LOS GENES DE FUSION, EN EL TESTICULO. A PESAR DE LA EXPRESION DIFERENCIAL DE LOS DOS GENES DE POLIUBIQUITINA, UBI Y UBII, AMBOS GENES PRESENTAN "SECUENCIAS RICAS EN CPG Y CONSTITUTIVAMENTE HIPOMETILADAS" (ISLAS HTF), EN LA REGION 5' "PROXIMAL" NO-CODIFICANTE. SE OBSERVA, ASIMISMO, LA COEXISTENCIA DE OTROS SITIOS CCGG "DISTALES", PARCIALMENTE METILADOS, JUNTO CON LAS ISLAS HTF, EN AMBAS POLIUBIQUITINAS