Resumen de Estudio de los estados de afinidad del subtipo a1, del receptor de adenosina por el agonista r-n6-fenilisopropiladenosina
NUMEROSOS ESTUDIOS FISIOLOGICOS, FARMACOLOGICOS Y BIOQUIMICOS SUGIEREN QUE LA ADENOSINA PUEDE DESARROLLAR IMPORTANTES FUNCIONES EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL POR VIA DE SU INTERACCION CON RECEPTORES ESPECIFICOS (RECEPTORES PURINERGICOS P1), LOS CUALES SON DE DOS TIPOS: LOS A1 QUE INHIBEN LA ACTIVIDAD ADENILATO CICLASA Y LOS A2 QUE LA ESTIMULAN, EN AMBOS CASOS POR MEDIACION DE PROTEINAS TRANSDUCTORAS G. EN ESTE TRABAJO SE HA PROFUNDIZADO EN EL CONOCIMIENTO DEL SUBTIPO A1 DEL RECEPTOR DE ADENOSINA. TRAS PONER A PUNTO LA TECNICA DE MARCAJE RADIOISOTOPICO QUE PERMITE CUANTIFICAR LOS RECEPTORES A1 POR UNION DEL RADIOAGONISTA SELECTIVO (3H)R-N6-FENILISOPROPILADENOSINA, SE HA DESARROLLADO UN METODO, DE APLICACION GENERAL, QUE PERMITE LA ESTIMACION DE LOS PARAMETROS DE EQUILIBRIO DE LA INTERACION LIGANDO - RECEPTOR SIN NECESIDAD DE PROCEDER A LA DETERMINACION EXPERIMENTAL DE LA UNION INESPECIFICA. SE HA DISEÑADO UN NUEVO METODO PARA LA DETERMINACION DE LOS PARAMETROS CINETICOS Y DE EQUILIBRIO DE UN SISTEMA CON UN RECEPTOR - UN LIGANDO, QUE COMBINA EXPERIMENTOS DE SATURACION DEL RECEPTOR Y DE ASOCIACION DE UNA CONCENTRACION DE LIGANDO EN FUNCION DEL TIEMPO. SE HA INVESTIGADO LA LOCALIZACION DEL RECEPTOR A1 DE ADENOSINA, Y DE LOS ENZIMAS 5'-NUCLEOTIDASA Y ADENOSINA DESAMINASA, EN DIVERSOS TEJIDOS DE CERDO Y EN FRACCIONES SUBCELULARES DE CORTEZA CEREBRAL. SE HA OPTIMIZADO EL PROCESO DE SOLUBILIZACION DEL RECEPTOR A1 DE ADENOSINA DE CORTEZA CEREBRAL DE CERDO. EN LAS MEMBRANAS EL RECEPTOR A1 PRESENTA DOS ESTADOS DE AFINIDAD (ALTA Y BAJA) EN SU UNION A AGONISTAS. EN EL EXTRACTO SOLUBILIZADO SOLO SE DETECTA EL ESTADO DE ALTA AFINIDAD. ESTE RESULTADO ES CONSISTENTE CON LA EXISTENCIA DE UNA INTERCONVERSION DE ESTADOS DE BAJA AFINIDAD EN ESTADOS DE ALTA AFINIDAD AL ALTERARSE LA INTEGRIDAD ESTRUCTURAL DE LA MEMBRANA. EL TRATAMIENTO DE LAS MEMBRANAS INTACTAS CON DIVERSAS PROTEASAS Y FOSFOLIPASAS HA PUESTO DE MANIFIESTO QUE EL ESTADO DE ALTA AFINIDA
