Estudio genético y molecular de la regulación transcripcional del gen de defensa ep5c

• Autores: María Agorio Norström Astrid
• Directores de la Tesis: Pablo Vera Vera (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat Politècnica de València ( España ) en 2006
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Montserrat Pages Torrens (presid.), Brande Wulff (secret.), Javier Paz Ares (voc.), Miguel Ángel Blázquez (voc.), Roberto Solano Tavira (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología molecular
    • Biología vegetal (botánica)
      • Genética vegetal
      • Parasicología vegetal
• Texto completo no disponible (Saber más ...)
• Resumen

  • El gen EP5C codifica una peroxidasa catiónica extracelular y fue identificado con Lycopersicon esculentum, donde se observó que su transcripción se induce en interacciones patogénicas compatibles e incompatibles. El H202 es la molécula señalizadora que activa la transcripción de EP5C, mientras que otras moléculas señalizadoras de la respuesta a patógenos como son el ácido salicílico (SA), ácido jasmónico (JA), o el etileno (ET) no lo hacen. En base a esta observación, en esta tesis se utilizó el gen EP5C como marcador para estudiar la vía de transducción de señales mediadas por H2O2 en la respuesta defensiva frente a patógenos. Para abordar dicho estudio se utilizó una estrategia de biología molecular complementada con estudios de genética reversa, además de una estrategia de genética directa utilizando los mutantes ocp (overrexpressor of cationic peroxidase) que activan la transcripción del transgén pEP5C::GUS de forma constitutiva en Arabidopsis thaliana.

    Mediante un análisis funcional del promotor de EPSC en A.thaliana se delimitó una zona del promotor de EP5C, de 51 pb, denominada R1 y necesaria para la activación de la transcripción del gen frente a Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000 (P.S.T. DC3000) o H2O2. Un rastreo de simple híbrido en levadura permitió identificar factores de transcripción de A.thaliana que se unen a R1, que pertenecen a la familia R2R3 de factores MYB o a la familia WIP. Tras la caracterización de la unión a R1 de los factores de transcripción MYB46, MYB112, y WIP2 se demostró que los dos primeros requieren de las tres guanina presentes en el elemento cis MBSII contenido en R1 para unirse a este último; por el contrario, el factor WIP2 requiere de al menos dos vueltas de hélice con los elementos cis MBSII, caja H, y caja G contenidos en R1.

    Estudios de resistencia frente al patógenos P.s.t. DC3000 señalaron que ninguno de los tres factores es necesario para el corre