Resumen de Viroide de la exocortis de los cítricos: variabilidad y análisis de los dominios implicados en la patogénesis
El viroide de la exocortis de los cítricos (CEVd) es el agente causal de la enfermedad denominada exocortis, cuyos síntomas principales son la presencia de acanaladuras y descamaciones en la corteza de especies de cítricos o géneros afines sensibles. La exocortis tiene especial importancia ya que algunas de las especies sensibles se utilizan comúnmente como patrones, lo que afecta al crecimiento del árbol y al rendimiento de la cosecha. El objetivo final de esta tesis ha sido el estudio de la patogénesis y de la variabilidad del CEVd. Se ha requerido para ello, la optimización tanto de la técnica de retrotranscripción y amplificación mediante la reacción en cadena de la DNA polimerasa (RT-PCR) como de los protocolos de extracción de ácidos nucleicos. La técnica de RT-PCR mejorada para el CEVd se aplicó también con éxito al resto de viroides de los cítricos: viroide de la hoja curvada de los cítricos (CBLVd), viroide del enanismo del lúpulo (HSVd), viroide III de los cítricos (CVd-III) y viroide IV de los cítricos (CVd-IV). Las nuevas estrategias propuestas para la amplificación de estos viroides resultan de gran utilidad para su caracterización molecular y, adicionalmente, como valiosas herramientas complementarias de diagnóstico en los programas de certificación de plantas libres de patógenos.
La utilización de esta técnica de RT-PCR mejorada permitió la identificación de una variante no conocida hasta ahora de CEVd presente en árboles de naranjo dulce procedentes del Sultanato de Omán que mostraba síntomas de "gummy bark" (enfermedad de etiología desconocida). Al no poder ser clasificada dentro de las clases conocidas A y B de CEVd (agresiva y suave, respectivamente) se procedió tanto a su caracterización molecular como biológica en una determinada gama de huéspedes. Debido a que la patogenicidad de este aislado resultó ser más suave que la de las cepas suaves de CEVd (clase B) y a que presentó características molecu
