Resumen de Criopreservacion de islotes pancreaticos: estudios de viabilidad "in vitro"
LA CRIOPRESERVACION (CP) PUEDE FACILITAR EL TRASPLANTE DE ISLOTES POR DIVERSAS RAZONES. EN ESTE TRABAJO SE DESARROLLA UNA TECNICA DE CP, CON LOS SIGUIENTES OBJETIVOS: 1. QUE SEA REPRODUCIBLE; 2. EVALUAR EN ISLOTES DE RATA (IR) CRIOPRESERVADOS SUS CARACTERISTICAS "IN VITRO"; 3. DETERMINAR EN IR EL EFECTO DEL CULTIVO ANTES DE LA CP; 4. ANALIZAR EN ISLOTES HUMANOS (IH) CRIOPRESERVADOS SUS CARACTERISTICAS "IN VITRO"; 5.
EVALUAR EN IH EL EFECTO DE LOS GRADIENTES DE EURO-FICOLL (GEF) ANTES DE LA CP. METODOS: OBJETIVO 1: GRUPOS DE IR O DE IH SE CRIOPRESERVARON SEGUN EL PROTOCOLO DE RAJOTTE.
OBJETIVOS 2 Y 3:
TRAS LA DIGESTION PANCREATICA LOS IR SE PESCAN A MANO Y SE DIVIDEN EN 4 GRUPOS: CL(CULTIVADOS 20-24 H), CPL (CP DESPUES DE CULTIVO 20-24 H), C7 (CULTIVADOS 7 DIAS) Y CP7 (CP TRAS 7 DIAS DE CULTIVO). OBJETIVOS 4 Y 5: LOS IH SE AISLAN SEGUN LA TECNICA DE RICORDI, SE PURIFICAN CON GEF Y SE CRIOPRESERVAN. SE ESTUDIAN TRES GRUPOS DE IH: 1 (PESCADOS A MANO DEL DIGERIDO PANCREATICO -DP- NO PURIFICADO), 2 (PESCADOS A MANO DEL DP NO PURIFICADO Y CRIOPRESERVADOS) Y 3 (PESCADOS A MANO DEL DP PURIFICADO Y CRIOPRESERVADOS). RESULTADOS: OBJETIVO 1: SE REALIZARON UN TOTAL DE 26 EXPERIMENTOS DE CP (144 LOTES). TRAS LA NUCLEACION EL ASCENSO MEDIO DE TEMPERATURA FUE DE 0,83 GRADOS C; LA VELOCIDAD MEDIA DE CONGELACION FUE DE 0,25 + 0,00 GRADO C/MIN. OBJETIVOS 2 Y 3: LA RECUPERACION FUE MAYOR EN EL GRUPO C1 QUE EN LOS OTROS TRES. EL CONTENIDO DE INSULINA, LA SECRECION DE INSULINA TRAS GLUCOSA (5,5 MM Y 16,7 MM) Y LEUCINA 10 MM + GLUTAMINA 10 MM Y LA OXIDACION DE D-(U- 14C) GLUCOSA FUERON MAYORES EN C1 QUE EN CP1 Y EN C7 QUE EN CP7. LOS ISLOTES DEL GRUPO CP7 NO ERAN SENSIBLES A LOS INCREMENTOS EN LA CONCENTRACION DE GLUCOSA (DE 5,5 MM A 16,7 MM). OBJETIVOS 4 Y 5: NO HUBIERON DIFERENCIAS ENTRE LOS GRUPOS 2 Y 3 EN CUANTO A RECUPERACION, CONTENIDO DE INSULINA, SECRECION DE INSULINA FRENTE A GLUCOSA Y VIABILIDAD TINTORIAL.
